首页 > 文献资料
-
白藜芦醇与紫杉醇联合用药对人喉癌Hep-2细胞凋亡机制的研究
喉癌是呼吸道肿瘤中常见的恶性肿瘤之一,在呼吸道肿瘤中高居第二位.白藜芦醇(resveratrol,Res)是一种多酚类物质,可通过抑制细胞内核苷酸还原酶抑制肝癌细胞、胃癌细胞、胰腺癌细胞等肿瘤细胞生长.紫杉醇(taxol,Tax)是红豆杉属植物中一种次生代谢物,可抑制细胞内微管的解聚,对乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌等肿瘤有良好的抗肿瘤活性.目前有关白藜芦醇联合紫杉醇用药针对人喉癌细胞株Hep-2的作用及其相关分子机制研究还鲜见报道.用白藜芦醇(Res)、紫杉醇(Tax)处理人喉癌细胞株Hep-2,采用CCK-8法检测2种药物对Hep-2细胞增殖的影响,AO/PI染色和JC-1检测Hep-2细胞凋亡,实时定量PCR检测Bax,Bcl-2,PARP,TRIB3,XIAP基因的表达,荧光定量法检测caspase-3,caspase-8活性.结果表明,与Tax,Re,单独用药相比,联合组显著增强对Hep-2细胞的抑制作用,且明显减少Tax的用药剂量,增加Bax,PARP,TRIB3的表达,降低Bcl-2,XIAP的表达,促进caspase-3,caspase-8活性.这表明Res,Tax以及其联合药物通过线粒体途径诱导喉癌细胞Hep-2的细胞凋亡.这为进一步研究Res,Tax联合用药治疗喉癌奠定理论基础,且扩大Res,Tax联合用药范围.
关键词： 白藜芦醇 紫杉醇 喉癌细胞株Hep-2 细胞凋亡 -
靶向封闭survivin诱导喉癌细胞凋亡及抑制其增殖的体外实验
目的:探讨靶向抑制survivin 表达对喉癌细胞凋亡和增殖的影响.方法:构建survivin反义RNA表达载体.用脂质体转染技术将重组质粒转染人喉癌细胞株Hep-2,利用G418(300 g/L的维持浓度)筛选,获得稳定转染株(HpEGFP/survivin).用Western-blot检测survivin 反义RNA封闭survivin后蛋白表达效果.吖啶橙染色和流式细胞仪、四唑盐(MTT)和软琼脂集落形成实验分别检测HpEGFP/surivin的凋亡和增殖状态的改变,并与Hep-2和转染空载体的细胞(HpEGFP-C1)进行比较.结果:Western-blot结果表明,构建的survivin反义RNA表达载体部分抑制了Hep-2 survivin蛋白的表达.转染反义survivin RNA载体的HpEGFP/survivin较Hep-2和HpEGFP-CI凋亡增多,其凋亡率较空载体对照组增加1.81倍,而其增殖力下降(P＜0.01),软琼脂集落形成能力也明显下降(P＜0.05).结论:构建的survivin反义RNA表达载体部分抑制survivin蛋白的表达,并拮抗了survivin基因的抗凋亡作用,抑制喉癌细胞体外增殖能力和生存能力.
关键词： 反义核苷酸 基因 survivin 喉癌细胞株Hep-2 细胞凋亡
