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基于液质联用及分子对接技术的短管兔耳草中XOD捕集成分研究
通过亲和超滤技术捕集藏药短管兔耳草总提取物中潜在的XOD抑制剂成分,随后运用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术快速鉴定捕集成分结构.应用Autodock 4.2分子对接软件研究捕集成分与XOD结合作用强弱与结合机制.结果共鉴定出17个化合物,其中黄酮类成分9个,酚酸类成分5个,三萜类成分3个.分子对接结果表明捕集成分均可与XOD自发结合,其结合方式主要以氢键、范德华力及疏水作用力为主.从结合能与打分函数看,所捕集成分均具有潜在的XOD抑制剂开发前景,其中黄酮类化合物木犀草素-3',7葡萄糖醛酸苷效果优.研究结果表明联用亲和超滤、超高效液相色谱-质谱(UF-UPLC-MS)及分子对接技术可为天然产物中XOD抑制剂成分的解析提供有力工具.
关键词： 短管兔耳草 UPLC-Q-TOF-MS 亲和超滤 分子对接 黄嘌呤氧化酶抑制剂 -
亲和超滤结合液质技术在中药有效成分发现中的应用
亲和超滤结合液质技术是一种快速、简单、有效的活性成分发现模式,尤其适用于成分组成复杂的中药提取物.通过亲和超滤可以简化活性成分的提取步骤,快速筛选具有潜在活性的小分子化合物;液质技术则可以实现活性成分的快速发现及鉴定,二者的结合在揭示中药药效物质基础以及以中药为基础的新药研发中均有重要作用.本文结合笔者近几年的研究,对亲和超滤结合液质技术在中药有效成分发现中的应用做简要综述,内容主要包括该技术的原理、特点及其应用成果与进展.
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多级超滤及亲和超滤法分离纯化NADH工艺的研究
研究出一种经济、高效、简便且容易放大的提取、分离和纯化辅酶NADH的工艺条件并进行优化.使用化学渗透法处理啤酒酵母细胞Saccharomyces cerevisiae粗提NADH,多级超滤及亲和超滤法进一步分离和纯化NADH.选用酵母醇脱氢酶(YADH)作为亲和配体,在pH值8.0,离子强度为0.1 mol/L时,用YADH和细胞渗透液中的NADH亲和.使用MWCO=30 000的滤膜超滤.结果:NADH YADH复合物留在截留液中,从而与其它小分子物质分离.改变pH值和离子强度,NADH-YADH复合物解离,通过MWCO=1 000的滤膜超滤,NADH分离到滤过液中,YADH作为截留而回收,回收率达93%,活性损失15%.试验表明使用化学渗透法处理酵母细胞,用亲和超滤纯化可获得高的NADH产率.和以前的方法相比具有简单、经济、省时、高效等特点,且容易放大.
关键词： 还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 膜分离技术 亲和超滤
