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基于分子亲和色谱技术的肉苁蓉低分子糖巨噬细胞激活作用靶点群鉴定与机制分析
探究肉苁蓉低分子糖(LMSC)对RAW264.7小鼠巨噬细胞的激活作用靶点蛋白群及相关作用机制.该研究首先通过测定巨噬细胞吞噬活性以及NO释放量来评价LMSC对RAW264.7巨噬细胞的激活作用.实验结果显示,LMSC在0.25~2g·L-1给药浓度可显著提高RAW264.7细胞的吞噬活性及NO的释放量,提示具有巨噬细胞激活作用.通过构建LMSC键合的环氧活化琼脂糖固相微球作为亲和介质,捕获RAW264.7细胞裂解液中特异性结合靶标蛋白;对高分辨质谱鉴定获得的LMSC靶标蛋白群进行信号通路富集分析,探讨LMSC巨噬细胞激活作用相关机制.实验共获得Eef2等24个LMSC靶点蛋白,分别涉及Fcγ受体依赖的吞噬、TNF-α NF-κB信号通路、糖酵解/糖原异生以及柠檬酸(TCA)循环和呼吸电子运输过程等10条巨噬细胞激活相关信号通路.以上结果提示LMSC通过作用于多个靶点进而调节细胞吞噬、NF-κB信号通路以及糖代谢途径终实现对RAW264.7巨噬细胞激活作用.
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女贞子炮制过程中2种三萜类成分及水溶性低分子糖含量变化规律研究
目的:研究不同炮制条件对女贞子中三萜类成分齐墩果酸、熊果酸及低分子糖含量的影响,探讨女贞子酒制过程中齐墩果酸、熊果酸及低分子糖含量的动态变化规律.方法:对女贞子生品、清蒸品、酒蒸品及不同加热时间酒炖品中齐墩果酸、熊果酸和低分子糖含量进行测定比较.结果:女贞子经不同方法炮制后齐墩果酸和熊果酸含量无明显变化,而水溶性低分子糖含量增加,且随着炖制时间的延长,炮制品中低分子糖含量逐渐增加.结论:炮制对女贞子中齐墩果酸和熊果酸含量无明显影响,对低分子糖含量有显著影响.