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补肾祛斑颗粒抑制细胞内黑色素合成机制
目的 观察补肾祛斑颗粒抑制细胞内黑色素合成的分子机制.方法 20只SPF级雌性SD大鼠完全随机分为生理盐水组(对照组)、补肾祛斑颗粒高、中、低剂量组,每组5只.高、中、低剂量组分别灌胃补肾祛斑颗粒4.8、2.4、1.2 g/kg(分别相当于临床剂量24、12、6倍),2次/日,共3日.提取含药血清.RT-PCR检测G蛋白偶联黑皮质素1受体(melanocortin 1 receptor,MC1R)、小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、酪氨酸酶(tyrosinase,TYP)、酪氨酸酶相关蛋白1(tyrosinase-related protein 1,TYRP1)及酪氨酸酶相关蛋白2(tyrosinase-related protein 2,TYRP2)mRNA水平的表达,Wertern-blot检测磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(phosphorylated-extracellular regulated MAP kinase1/2,p-ERK)、TYP、TYRP1及TYRP2蛋白水平的表达,NaOH溶解法测定细胞内黑色素含量,多巴色素法测定细胞TYP活性,MTr检测细胞活性.结果 与对照组比较,各给药组MC1 R、MITF、TYP、TYRP1及TYRP2 mRNA水平表达降低(P＜0.05),TYP、TYRP1、及TYRP2蛋白水平表达降低(P＜0.05),细胞内黑色素含量及TYP活性降低(P＜0.05),p-ERK及细胞增殖活力升高(P ＜0.05);PD98059抑制ERK后,各给药组MC1 R、MITFmRNA水平表达差异无统计学意义(P＞0.05).与对照组比较,高剂量组TYP、TYRP1及TYRP2 mRNA表达降低(P＜0.05),p-ERK、TYP、TYRP1及TYRP2蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05),细胞内黑色素含量、TYP活性及细胞增殖活力差异无统计学意义(P＞0.05).结论 补肾祛斑颗粒可能通过上调p-ERK来抑制细胞内TYP及其相关蛋白表达,抑制细胞内黑色素合成.
关键词： 黄褐斑 补肾祛斑颗粒 含药血清 酪氨酸酶及其相关蛋白 黑色素
