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淫羊藿苷基于ERα-Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠成骨分化的影响及机制研究
目的:探讨淫羊藿苷基于ERα-Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠体内成骨分化的影响及作用机制.方法:80只雌性SD大鼠随机分为4组:假手术+生理盐水组(Sham-Veh)20只,假手术+淫羊藿苷组(Sham-Icariin)20只,去势+生理盐水组(Ovx-Veh)20只,去势+淫羊藿组(Ovx-Icariin)20只.分别在术后4周、8周进行Micro-CT相关参数(Tb.N、Tb.Th、Tb.Sp、BV、BV/TV及BMD)、RT-PCR相关指标(ALP、COL-1、OPG/RANKL、OCN、RunX2、ERα和GAPDH)及染色(β-catenin免疫荧光染色、HE染色及TRAP染色)评价.结果:骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨体积(BV)、骨与组织体积比(BV/TV)及骨密度(BMD)在术后4周和8周时,淫羊藿苷组均高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05);而骨小梁间距(Tb.Sp)在术后4周和8周时,淫羊藿苷组均低于生理盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05).淫羊藿苷组在ALP、COL-1、OCN、RunX2和ERα方面均高于生理盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05);而淫羊藿苷组在OPG/RANKL方面低于生理盐水组,差异具有统计学意义(P<0.05).淫羊藿苷组(Sham+Ovx)的β-catenin免疫荧光染色明显多于生理盐水组(Sham+Ovx);在HE染色方面,淫羊藿苷组(Sham+Ovx)的骨组织明显多于生理盐水组(Sham+Ovx);而在TRAP染色方面,淫羊藿苷组(Sham+Ovx)的破骨细胞明显少于生理盐水组(Sham+Ovx).结论:淫羊藿苷在大鼠体内可以通过ERα-Wnt/β-catenin信号通路促进BMSCs的成骨分化,促进骨生成,并可通过ERα相关的OPG/RANKL/RANK系统抑制破骨细胞的生成,抑制骨吸收.
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荣骨颗粒对卵巢切除后骨质疏松大鼠骨形态计量的影响
目的探索补肾中药荣骨颗粒对去势大鼠骨质疏松症的防治作用.方法摘除大鼠双侧卵巢造成骨质疏松症模型,分别灌服大、中、小剂量的荣骨颗粒,并与己烯雌酚和骨疏康组作对照,3个月后,进行骨形态计量测定和分析.结果大中剂量的荣骨颗粒能使切除卵巢大鼠骨小梁体积百分比显著增高,骨小梁吸收表面百分比、骨小梁形成表面百分比、活性生成表面百分比、骨小梁矿化率、类骨质平均宽度及骨皮质矿化率均明显降低.结论大、中剂量的荣骨颗粒对卵巢切除后的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用;小剂量荣骨颗粒无明显作用,而大剂量则优于中剂量组的治疗作用.
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全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎转录因子Osterix蛋白表达的影响
目的:观察全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎转录因子Osterix蛋白表达的影响,探讨全身垂直振动治疗绝经后骨质疏松的作用机制.方法:将36只3月龄健康雌性未孕SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、去卵巢静止组(OVX组)和去卵巢振动组(WBV组),每组12只.手术后10周,WBV组开始接受全身垂直振动治疗.振动频率90 Hz,重力加速度3.8 g,振幅0.5 mm,每天2次,每次15 min,每周7天,振动7周.振动结束后,腹主动脉取血处死各大鼠,接解剖位置分离第2腰椎(L2)和第3腰椎(L3).用HE染色观察L2组织形态学变化;用TRAP染色法对L2石蜡切片破骨细胞进行染色并计数;用免疫组化检测L2转录因子Osterix定位变化;用Western blot检测L3转录因子Osterix蛋白表达水平的变化.结果:与Sham组和WBV组比较,OVX组大鼠腰椎骨髓腔脂肪空泡数目、骨小梁表面破骨细胞数目显著增加,而转录因子Osterix蛋白表达显著下降.结论:全身垂直振动能降低去卵巢骨质疏松大鼠腰椎破骨细胞的数目,增强腰椎转录因子Osterix蛋白的表达.
关键词： 全身垂直振动 骨质疏松大鼠 转录因子Osterix -
双手诊脉技术结合气功理论对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度及钙磷代谢的影响
目的：探讨双手诊脉技术结合气功理论对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度的影响。方法选取雌性的SD大白鼠120只,随机分为正常组、模型组、仙灵骨葆组、针刺组,每组30只,正常组不做造模手术,其余3组均做摘除卵巢的造模方法,术后10 d开始给予灌药处理,模型组灌服生理盐水,仙灵骨葆组灌服仙灵骨葆水溶剂,针刺组给予双手诊脉技术结合气功。90 d后检测四组大鼠的骨密度(BMD)指标。结果较正常组大鼠全身BMD、腰椎BMD、右侧股骨BMD、右侧股骨骨矿含量(BMC)分别为(0.131±0.008)、(0.213±0.016)、(0.159±0.014)g/cm2、(0.631±0.020)g,模型组的上述指标分别为(0.102±0.006)、(0.168±0.009)、(0.117±0.006)g/cm2、(0.407±0.012)g均显著下降(P<0.05)；与模型组比较,仙灵骨葆组与针刺组的鼠骨密度含量均显著升高(P<0.05),与仙灵骨葆组比较,针刺组的鼠骨密度均显著升高(P<0.05)。结论双手诊脉技术结合气功理论能够显著提高去卵巢骨质疏松大鼠的BMD及BMC对去卵巢骨质疏松大鼠具有一定的治疗价值。
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运动加中药对骨质疏松大鼠骨计量学的影响
目的 观察运动与中药联合作用对骨质疏松大鼠骨组织形态计量学的影响.方法 雌性SD大鼠随机分为正常对照组、去卵巢手术组、雌激素对照组、运动组、中药组、运动+中药组.正常对照组行假手术,其余各组行双侧卵巢切除术,术后3个月开始为期3个月的治疗.雌激素对照组用尼尔雌醇治疗, 中药组和运动+中药组应用中药治疗,运动组和运动+中药组按要求进行运动.治疗结束后对腰椎骨作骨组织形态计量学分析.结果 运动+中药组骨小梁的数目在治疗各组中多,骨小梁分离度在各治疗组中小,矿化沉积率在各组高.结论 运动与中药联合治疗方法对骨质疏松大鼠腰椎骨,具有促进骨形成和抑制骨吸收的双重作用.
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淫羊藿总黄酮在骨质疏松大鼠体内的药动学行为
目的 研究淫羊藿Epimedii Folium总黄酮在骨质疏松大鼠体内的药动学行为.方法 12只大鼠分为模型组和假手术组,双侧卵巢摘除法复制骨质疏松大鼠模型.灌胃总黄酮(500 mg/kg)后,HPLC-DAD法测定13个时间点(0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、12、24、48 h)总黄酮原型苷(朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿苷)及其代谢产物(箭藿苷A、箭藿苷B、2"-O-鼠李糖基淫羊藿次苷Ⅱ、宝藿苷Ⅰ、淫羊藿苷元)的血药浓度,绘制药-时曲线,计算药动学参数.结果 总黄酮原型苷及其代谢产物在2组大鼠体内的药-时曲线均呈双峰.与假手术组相比,模型组的整合AUC和Cmax均显著降低(P＜0.01),t1/2显著延长(P＜0.01).结论 在大鼠骨质疏松状态下,淫羊藿总黄酮的体内吸收和代谢显著变慢,从而影响其药效发挥.
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筋骨胶囊对骨质疏松大鼠骨髓细胞OPG和RANKL mRNA表达量的影响
目的:观察筋骨胶囊对骨质疏松大鼠骨髓细胞护骨素(OPG)和核因子kB受体活化子配体(RANKL) mRNA表达量的影响,从分子水平上进一步探讨筋骨胶囊治疗骨质疏松症的有效机制.方法:取健康6月龄雌性SD大鼠48只,采用摘除双侧卵巢去势方法造成大鼠骨质疏松模型,随机分为假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组(0.5 mg/kg)、筋骨胶囊组(0.27 g/kg)4组.用药12周后,处死所有大鼠,并取双侧股骨骨髓为标本,运用现代分子生物学RT-PCR技术,测量各大鼠骨髓基质细胞的OPG和RANKLmRNA表达量.结果:模型组OPG和RANKL mRNA表达量均明显高于假手术组(P＜0.01);阿仑膦酸钠组OPG mRNA表达量与模型组对比差异无统计学意义(P＞0.05),阿仑膦酸钠组RANKL mRNA表达量明显低于模型组(P＜0.01);筋骨胶囊组OPG mRNA表达量明显高于模型组(P＜0.01),筋骨胶囊组RANKL mRNA表达量明显低于模型组(P＜0.01);筋骨胶囊组OPG mRNA表达量明显高于阿仑膦酸钠组(P＜0.01),筋骨胶囊RANKL mRNA表达量与阿仑膦酸钠组相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论:筋骨胶囊能有效地上调OPG mRNA表达量,并抑制RANKL mRNA的表达,通过影响OPG/RANKL系统,抑制骨吸收,并促进骨形成,能有效地防治骨质疏松症.
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补肾壮骨方抗骨质疏松的实验研究
目的:探讨补肾壮骨方治疗摘除卵巢所致雌性大鼠骨质疏松的作用机理.方法:选用12月龄雌性SD大鼠摘除双侧卵巢,造成骨质疏松,随机分为正常对照组、模型对照组.补肾壮骨方大、中、小剂量组、乙烯雌酚组.检测血钙、血磷、尿钙、骨钙素含量、骨密度、骨小梁计数及性激素等.结果:补肾壮骨方可明显提高E2水平,降低FSH、LH水平;大剂量组使尿钙排出量降低,血清骨钙素增加.股骨X光片图象分析表明,补肾壮骨方可提高股骨远端骨骺端骨密度骨干皮质厚度、皮质密度、骨干髓质密度及骨密度,改善骨组织形态使骨小梁个数增多.结论:本研究证明补肾壮骨方可改善摘除卵巢大鼠所致的骨质疏松,其作用机理为提高E2水平,具有性激素样作用.
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中药补肾壮骨方对骨质疏松大鼠骨量和血脂作用的实验研究
目的探讨补肾壮骨方对实验性去势大鼠(模型鼠)骨质疏松的影响.方法实验选用健康8个月龄雌性Wistar大鼠48只,按体重分层随机分为假手术组、卵巢切除组(空白对照组)、补肾壮骨方小剂量组、中剂量组、大剂量组,并以尼尔雌醇作阳性对照物,观察补肾壮骨方对模型鼠的防治作用.结果补肾壮骨方的各剂量组可令模型鼠骨密度增加,并使其腰椎骨组织形态学、血脂水平得到改善,甘油三酯、胆固醇和低密度脂蛋白水平明显降低,而高密度脂蛋白水平明显升高.结论补肾壮骨方对模型鼠骨质疏松有较好的骨内外防治作用.
