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醒脑静对脑缺血再灌注大鼠神经细胞自噬作用的影响
目的 探讨醒脑静对脑缺血再灌注(CIR)过程中神经细胞自噬的疗效及可能作用机制.方法 用栓线法制备90只大脑中动脉栓塞大鼠模型,选取符合要求的模型大鼠随机分为2大组:MRI组(20只)和WB组(70只),MRI组随机分为2小组:模型对照组10只,醒脑静组10只;WB组随机分为7组:模型组,溶媒组,醒脑静组,3-MA组,3-MA+醒脑静组,雷帕霉素(Rapa)组,Rapa+醒脑静组(每组10只).用磁共振成像检测MRI组大鼠用药前后模型脑梗的体积,计算脑梗体积占全脑体积的比例;用免疫印迹法检测WB组大鼠细胞内自噬相关蛋白的表达.结果 MRI组:各组大鼠给药24h后的脑梗体积比例均大于给药前的脑梗体积比例,差异具有统计学意义(P＜0.05);醒脑静组的脑梗体积比例小于模型对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).WB组:与模型组相比,醒脑静组、3-MA组与3-MA+醒脑静组的Bec-lin1和LC3的表达量均降低,Bcl-2的表达量升高,差异具有统计学意义(P＜0.05),且3-MA组+醒脑静组优于3-MA组与醒脑静组(P＜0.05);Rapa组与Rapa组+醒脑静组Beclin1和LC3的表达量均高于模型组、醒脑静组、3-MA组与3-MA组+醒脑静组,Bcl-2表达量低于模型组、醒脑静组、3-MA+醒脑静组(P＜0.05),且Rapa+醒脑静组Beclin1和LC3低于Rapa组,Bcl-2高于Rapa组(P＜0.05).Bcl-2与Bec-lin1之间的表达量呈负相关.结论 醒脑静可抑制大鼠脑缺血再灌注过程中的自噬反应,提高受损神经细胞的存活率.
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电针曲池、足三里穴对大脑中动脉阻塞大鼠缺血周围纹状体区神经细胞自噬的影响
目的:观察电针曲池、足三里穴对大脑中动脉阻塞(MCAO)缺血再灌注损伤大鼠缺血周围纹状体区神经细胞自噬的影响.方法:将36只SD大鼠按照随机数字表分为假手术组、模型组和电针组各12只.参考Koizumi线栓法构建MCAO大鼠模型后,电针组采用电针曲池、足三里穴干预3d,假手术组和模型组不予以电针刺激.TTC染色观察梗死体积,电镜观察自噬体和线粒体结构,并检测自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3B(1ight chain 3B,LC3B)的表达水平.结果:TTC染色显示,电针组MCAO大鼠脑梗死体积较模型组减少(P＜0.05);电镜观察发现,模型组溶酶体和自噬泡数量增加,而电针组该现象减弱;电针组LC3BⅡ/LC3B Ⅰ水平较模型组升高(P＜0.05).结论:在脑缺血再灌注损伤亚急性期,电针曲池、足三里穴可抑制缺血周围纹状体区因溶酶体和自噬溶酶体过度释放引起的神经细胞自噬性死亡,其机制还有待进一步研究.
