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一种基于连续PMCA的PrPSc体外扩增方法的建立
为建立一种基于蛋白质错误折叠循环扩增(PMCA)的体外稳定扩增方法以观察PrPSc是否能在体外连续传代,我们分别制备了正常仓鼠和羊瘙痒病因子263K感染的发病仓鼠的全脑匀浆,将两种脑匀浆以不同体积比混合后,分别进行144个循环的直接PMCA和每轮48个循环、共8轮的连续PMCA,用Western blot对PrPSc的扩增情况进行检测.结果显示,与常规的直接PMCA方法相比,连续PMCA能更有效地使低浓度的PrPSc扩增到可检出的水平,表明连续PMCA可以支持羊瘙痒因子263K在体外长期稳定的复制.连续PMCA方法是一种体外高效地扩增PrPSc的方法,有潜力成为一种Prion体外培养方法,用于研究Prion错误折叠和复制机制,以及检测脑组织、外周组织和体液样品中的微量PrPSc.
关键词： Prion病 PrPSc PrPC 蛋白质错误折叠循环扩增 -
Doppel蛋白研究进展
朊蛋白PrPC的错误折叠形式即PrPSc,它是瘙痒症感染因子的主要组成部分,也是可传播性海绵样脑病(TSE)的致病因子,但是PrPSc既不引发免疫应答也不产生炎症反应.编码细胞水平的PrPC蛋白的基因Prnp 20年前就已经被克隆,但是其基因序列及功能仍不清楚.直到1999年才发现了一种新蛋白,命名为Doppel(Dpl),此蛋白与PrPC在生化和结构方面有不少相似性,其一级结构与PrPC C端的2/3有25%的同源性.尽管有关Dpl的研究尚处于萌芽状态,但它的发现已经解释了朊蛋白生物学上的一些谜团,而且对其生理功能也有了一定的了解.本文综述了近年来对Doppel蛋白的研究进展.
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细胞型朊蛋白分子结构及其相关疾病的研究进展
细胞型朊蛋白(cellular prion protein,PrPC)是一种高度保守且广泛表达的糖磷脂酰基醇(glycosyl phosphatidyl inositol,GPI)锚定糖蛋白,定位于脂筏.在哺乳动物体内,PrPC在中枢神经系统和网状内皮系统中大量存在,其它组织中有少量分布.目前研究表明,PrPC分子结构具有重要的生理功能之外,还与神经系统疾病和肿瘤发生等相关.本文重点阐述了PrPC的分子结构、组织分布及其相关疾病研究进展.
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朊粒及其相关感染
朊粒(prion)又称朊毒体,是引起人和动物发生传染性海绵状脑病(transmissible spongiform encephalopathy,TSE)的病原体.近年来,与其相关的牛海绵状脑病(bovine spongiform encephalo pathy, BSE)在英国严重流行,且已证实BSE的病原因子可传染给人类而引起新变异型克-雅病,为世界各国高度关注.
