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小菜蛾颗粒体病毒晚期表达因子基因的功能分析
小菜蛾颗粒体病毒(Plutella xylostella granulovirus,PlxyGV)基因组含有15个杆状病毒晚期表达因子(Late expression factor,lef)基因同源物.PlxyGV的14个lef基因(不包括ie-0)预期编码产物与苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus,AcMNPV) LEF蛋白的序列相似度为13％～53％.其中,LEF-8、LEF-9和P47在两种病毒之间的相似度较高,分别为49％、53％和46％.为了研究不同杆状病毒种间lef基因的功能相关性,验证PlxyGV lef基因的功能,本文利用AcMNPV的一个瞬时表达实验系统测试PlxyGV lef基因在Sf9细胞中激活AcMNPV晚期启动子控制的报告基因表达的能力.实验结果显示,在其它AcMNPV lef基因都存在的情况下,PlxyGV lef-2能够部分替代AcMNPV lef-2的活性.序列对比结果显示PlxyGV LEF-2的C端末比其它GV和鳞翅目NPV的LEF-2分别多出约100 aa和70 aa.
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灰斑古毒蛾核型多角体病毒三个晚期表达因子基因
将灰斑古毒蛾(Orgyia ericae)单粒包埋型核型多角体病毒(OrerSNPV)基因组DNA的各EcoRI酶切片段进行克隆和测序.序列分析结果表明EcoRI-M(3.0kb)与EcoRI-P片段(2.2kb)相连处含有编码晚期表达因子(LEF-2)的开放阅读框(ORF).同时在EcoRI-E(约10kb)片段两端分别含有lef-3和lef-11基因的部分序列.lef-2基因编码区由648bp组成,可编码216个氨基酸残基的多肽,预计蛋白质分子量为23.7kDa.将OrerSNPVLEF-2氨基酸序列与其它已知的27种杆状病毒的LEF-2序列比较,发现OrerSNPV与其它鳞翅目NPV LEF-2氨基酸有35%～49%同源性,其中与BusuSNPV、MaMNPV-A、HezeSNPV、HearSNPV和LdMNPV同源性高,和GV有26%～31%同源性,与膜翅目松柏锯角叶蜂NPV的同源性为32%,与库蚊杆状病毒的同源性只有23%.根据氨基酸序列绘制的分子进化树表明28种杆状病毒lef-2基因可以分为鳞翅目NPV、GV、膜翅目NeseNPV与双翅目Culex nigripalpus Baculovirus四个分支.OrerSNPVlef-2与BusuSNPV在进化树上关系为接近,而OrerSNPVlf-3和LdMNPV的接近,OrerSNPVlef-11则和SeMNPV的关系接近.
