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昆虫杆状病毒经口感染因子P74的结构和功能
杆状病毒(Baculovirus)是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒,在自然界中以节肢动物(主要是昆虫)作为专一性宿主进行感染和传播.包涵体衍生型病毒是杆状病毒的一种表型,主要通过宿主经口食入引发感染.多种包涵体衍生型病毒囊膜蛋白在病毒原发感染过程中发挥作用,它们被称为经口感染因子.P74是早被鉴定且研究为深入的一种经口感染因子,本文从五个方面综述了国内外关于P74的研究成果.P74含有三个跨膜结构域和两个功能结构域.在病毒释放过程中,P74会分别受到包涵体内碱性蛋白酶和宿主中肠胰蛋白酶酶切,P74及其酶切产物和囊膜表面稳定复合物有微弱相互作用.作为病毒结合蛋白,P74和刷状缘囊膜中一个大小约为35kDa的蛋白存在相互作用,使得病毒结合到宿主细胞上.对P74结构和功能的深入研究将促进我们对昆虫杆状病毒原发感染详细分子机制的认识,并为农业生产病害控制提供参考.
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ClanGV的PIF0与其他经口感染因子间的互作研究
本文旨在通过酵母双杂交技术研究杨扇舟蛾颗粒体病毒(ClanGV)的经口感染因子PIF0和其他经口感染因子PIF1～PIF6之间的互作关系.首先根据ClanGV的基因组序列信息,利用在线软件TMHMMServer v.2.0对PIF0～PIF6进行跨膜区分析,确定需要扩增的片段.然后以诱饵载体pGBKT7和捕获载体pGADT为出发载体,构建了PIF0的重组诱饵载体(B0)和PIF1～PIF6的重组捕获载体(A1～A6).自激活实验证明,重组诱饵载体B0没有自激活特性,可以进一步开展蛋白的互作研究.酵母双杂交结果证明,PIF0作为诱饵载体时,可以与PIF3和PIF5的重组捕获载体发生蛋白相互作用,与PIF1、PIF2、PIF4和PIF6都没有互作现象.本研究结果将有助于揭示PIF0在ClanGV经口感染过程中的功能,并可为阐明ClanGV的经口感染机制以及开发新型病毒杀虫剂和增效剂奠定基础.
