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125I标记消脂素的制备研究
以间接碘标记法与直接碘标记法标记消脂素(leptin,LEP),并分别建立LEP的RIA进行方法学的比较.间接碘标记法先以氯胺T法标记对羟基苯丙酸琥珀酰亚胺脂(BH试剂)制备125I-BH,并与LEP进行联结制备125I-LEP.125I-LEP放射性比活度为1.43 MBq/μg,125I的总标记率为37.8%,125I-LEP的大结合率(Bmax)为97.5%.所建立的RIA的NSB为6.7%,零计量管(B0)的结合率(B/T)为43.7%,灵敏度为0.25μg/L,高、中、低三种浓度的样品批内CV为7.8%,批间CV为12.9%,回收率为96.4%~103.2%,与TSH、LH、FSH、PRL、GH及Ins等均无交叉反应,与Linco的药盒进行临床测试对比亦显示良好的线性关系,r为0.951,以间接碘标记法标记的125I-LEP在45天内其标准曲线的稳定性较直接法标记的125I-LEP有较大的提高,能满足临床工作的需求.
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人瘦素放射免疫分析法的研究
目的:建立人瘦素的放射免疫分析(RIA)方法并用于临床. 方法:以重组人瘦素(LPT)小剂量多次刺激新西兰白兔制备抗血清,以间接碘标记法制备125I-LPT,然后建立LPT的RIA法并用于临床. 结果:LPT的抗血清工作液稀释度为1∶6 400;125I-LPT的放射性比活度为1.43 MBq/μg,125I 的总标记率为37.8%;LPT的RIA各项技术指标均符合要求;临床检测结果,正常男性为(4.9±2.7)μg/L,女性为(8.9±4.0)μg/L,性别差异显著(P<0.01). 结论:LPT的RIA方法各项考核指标均较好,女性的LPT水平明显高于男性.