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miR-137对肾癌GRC-1细胞增殖与凋亡的影响
目的 研究miR-137对肾癌GRC-1细胞增殖与凋亡的影响.方法 采用miR-137模拟物转染至肾癌GRC-1细胞,实验分为未转染组(未进行miR-137模拟物转染)、miR-137对照组(转染随机序列)、miR-137转染组(进行miR-137模拟物转染).荧光定量PCR检测各组转染后48h细胞中miR-137表达水平,应用噻唑蓝细胞增殖试验(MTT)、流式细胞检测技术与免疫荧光评价miR-137对肾癌GRC-1细胞增殖和凋亡的影响.结果 转染miR-137模拟物48h后,荧光定量PCR检测发现未转染组、miR-137对照组及miR-137转染组GRC-1细胞中miR-137的相对表达量依次为(24.43±2.03)％、(26.57±2.55)％、和(73.30±3.29)％,差异有统计学意义(P＜0.05).MTT细胞增殖实验与流式细胞仪检测结果显示,与未转染组、miR-137对照组相比,miR-137转染组转染48h后肾癌GRC-1细胞的增殖率显著降低,凋亡率显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05),而未转染组、miR-137对照组肾癌GRC-1细胞的增殖率、凋亡率比较差异无统计学意义(P＞0.02).结论 miR-137可明显抑制肾癌GRC-1细胞增殖和促进其凋亡,故有望成为肾癌基因治疗的新靶点.
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靶向siRNA干扰hIAP-2联合姜黄素抑制肾癌GRC-1细胞增殖的实验研究
目的 应用hIAP-2特异性siRNA干扰肾癌GRC-1细胞hIAP-2基因的表达,探讨siRNA-hIAP-2联合姜黄素对肾癌GRC-1细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外化学合成针对hIAP-2的siRNA,通过阳离子脂质体将siRNA-hIAP-2转染肾癌GRC-1细胞,实时荧光定量PCR检测hIAP-2 mRNA表达水平,免疫印迹检测其蛋白表达水平,MTT法及流式细胞术分别测定siRNA-hIAP-2联合姜黄素处理后对肾癌GRC-1细胞增殖及凋亡的影响.结果 靶向hIAP-2的siRNA可以有效抑制肾癌GRC-1细胞的hIAP-2的表达,siRNA-hIAP-2和姜黄素均可抑制GRC-1细胞增殖并诱导其一定程度的凋亡,当联合应用靶向hIAP-2的siRNA和姜黄素时,上述作用显著增强(P<0.05).结论 体外化学合成的siRNA-hIAP-2可以有效抑制肾癌GRC-1细胞的hIAP-2的表达,并能显著增强姜黄素诱导肾癌细胞GRC-1凋亡的敏感度,提示hIAP-2可作为姜黄素治疗肾癌的有效增敏靶点.
