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  • 三种荧光色素标记的CD4抗体在流式细胞术研究T辅助细胞中的有效性评价

    作者:郑翠玲;韩晓红

    探讨三种荧光色素标记的CD4抗体在流式细胞术检测培养刺激前后的T 辅助(Th)细胞中的有效性,从而确定Th细胞研究时优选且有效的CD4抗体.将佛波脂(PMA)和离子霉素(Ion)培养刺激前后的正常人外周血单个核细胞(PBMC)分别用CD3-APC和CD8-PerCP确定Th细胞(CD3+CD8- T细胞)百分率,用CD4-PerCP、CD4-FITC和CD4-APC确定Th细胞(CD4+ T细胞)百分率.并用免疫磁珠分选后的CD4+ T细胞验证CD4-APC抗体在Th细胞研究中的有效性.结果显示:Th细胞(CD3+CD8- T细胞)百分率在培养刺激前后基本无差别(P>0.05),而Th细胞(CD4+ T细胞)百分率有所下降,其中CD4-PerCP下降的明显(P<0.05),CD4-FITC和CD4-APC轻微下降(P>0.05).就平均荧光强度(MFI)而言,CD4-APC在三种荧光色素的CD4抗体中强,且与培养刺激前相比,培养刺激后的CD4-APC下降不明显(P>0.05),而CD4-PerCP和CD4-FITC平均荧光强度明显下降 (P<0.05).免疫磁珠分选后的细胞亦证实培养刺激对于CD4-APC表达的影响很小.结论:三种荧光色素抗体中,优选的CD4-APC抗体在流式细胞术中用于Th细胞研究是有效的.

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