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ADAM15、MMP-2和MMP-9在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达差异
目的 分析ADAM15、MMP-2和MMP-9在不同转移能力乳腺癌细胞系中的表达,探讨其与乳腺癌细胞转移的相关性.方法 Transwell小室实验检测两种乳腺癌细胞系的转移能力,免疫细胞化学法对ADAM15、MMP-2及MMP-9在两种细胞中的表达进行定性、定位及半定量检测,Western blot对其进行定量检测.结果 MDA-MB-231乳腺癌细胞系的运动和侵袭能力均强于MCF-7乳腺癌细胞系.ADAM15、MMP-2及MMP-9在MDA-MB-231细胞系中的表达分别高于MCF-7细胞系(免疫细胞化学:P＜0.001,P＜0.05,P＜0.001;Western blot:P ＜0.01,P＜0.05,P＜0.01),且三者在两系乳腺癌细胞表达的差异中,ADAM15表达的差异性大,其次为MMP-9,MMP-2的差异性小.结论 ADAM15、MMP-2及MMP-9均促进乳腺癌转移,且ADAM15与转移相关性强而可能成为判断乳腺癌恶性生物学行为的指标.
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解聚素金属蛋白酶8、15、19在类风湿关节炎中表达研究
目的 探讨解聚素金属蛋白酶(a disintegrin and metalloproteinase domain,ADAM)家族中ADAM8、15、19在类风湿关节炎(RA)中的表达研究.方法 使用实时荧光定量PCR(real-time PCR)技术检测RA患者、骨关节炎(osteoarthritis,OA)患者和痛风性关节炎(gouty arthritis,GA)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中ADAM8、15和19的表达,并且和疾病的炎症活动指标及标志性抗体进行相关分析,疾病炎症活动相关指标包括红细胞沉降率(erythrocytesedimentationrate,ESR)、C反应蛋白(C reactive protein,CRP),此外还包括RA的类风湿因子(rheumatoid factor,RF)和抗环瓜氨酸肽(anti-citrullinatedprotein antibody,anti-CCP)抗体.结果 与对照者相比,ADAM8在RA、OA及GA组均增高,而正常对照者表达水平较低,差异有统计学意义(P=0.0001);ADAM8和疾病的活动性指标CRP具有相关性(r=0.330,P=0.002);ADAM15在RA、OA及GA中表达增高,但在RA中的表达升高尤其明显,差异有统计学意义(P=0.0035),ADAM15和RA的RF具有相关性(r=0.319,P=0.016);ADAM19只在RA中表达增高,差异有统计学意义(P=0.0086),ADAM19和RA的RF具有相关性(r=0.314,P=0.018).结论 ADAM8参与了RA、OA和GA的发病过程,并与上述3种关节炎的活动性指标具有相关性.ADAM15及ADAM19主要参与了RA的发病,且ADAM 15、ADAM19与RA的RF具有相关性.
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ADAM15通过激活EGFR促进结直肠癌细胞的转移侵袭
目的 探讨结直肠癌细胞中ADAM15的表达及其对结直肠癌细胞迁移侵袭能力的影响.方法 Western blotting检测人正常结直肠黏膜细胞系FHC和人结直肠癌细胞系Caco-2、SW-480、DKO-1中ADAM15蛋白的表达.向SW-480细胞分别转染siNC(siNC组)和siADAM15(siADAM15组),细胞划痕实验和Transwell实验检测两组SW-480细胞迁移、侵袭能力;Western blotting检测siNC组、siADAM15组和FHC细胞系中p-EGFR、EGFR、ADAM15蛋白的表达.结果 Caco-2、SW-480及DKO-1细胞系中ADAM15表达量分别为2.01±0.149、2.74±0.053、2.27±0.185,均高于FHC细胞系的0.98±0.043,差异有统计学意义(P＜0.05).划痕实验显示,siADAM15组24 h划痕宽度与0 h划痕宽度比值为0.925±0.087,明显高于siNC组的0.326±0.031,差异有统计学意义(P＜0.05).Transwell实验显示,siADAM15组SW-480细胞侵袭数目为327.4±42.13,显著低于siNC组的669.7±35.21,差异有统计学意义(P＜0.05).siNC组SW-480细胞中p-EGFR表达量为0.89±0.097,显著高于FHC细胞系的0.42±0.035,差异有统计学意义(P＜0.05);siADAM15组SW-480细胞中p-EGFR表达量为0.27±0.067,显著低于siNC组的0.89±0.097,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ADAM15可能通过激活EGFR促进结直肠癌细胞的迁移侵袭过程.
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125I标记抗人ADAM151多克隆抗体在荷胃癌裸鼠体内的生物分布和放射免疫显像
目的 研究125I标记抗人ADAM15多克隆抗体(125I-anti-ADAM 15抗体)在荷人胃癌裸鼠体内的生物分布.方法 以氯胺T法制备125I-anti-ADAM15抗体并测定其在生理盐水和人血清中的稳定性.经荷胃癌裸鼠模型尾静脉注入125I-anti-ADAM15抗体后1、4、8、24和48 h对裸鼠进行SPECT平面显像,采用感兴趣区(R0I)技术进行半定量分析,计算肿瘤与非瘤组织的放射性计数比值(T/NT)和肿瘤与裸鼠全身的放射性计数比值.于48 h显像后处死荷瘤裸鼠,取心、肺、甲状腺和肿瘤等多个脏器组织称重并测量其放射性计数,计算各组织的每克组织百分注射剂量率(％ID/g).结果 125I-anti-ADAM 15抗体标记率为(75.16 +9.43)％,纯化后放射化学纯度可达(99.44±0.21)％.经尾静脉注入125 I-anti-ADAM15抗体后,随时间的延长,T/NT逐渐增高.在48h时肿瘤清晰显影,T/NT可达3.84±0.43.结论 125I-anti-ADAM15抗体在荷胃癌裸鼠体内具有肿瘤靶向定位能力,能获得良好的放射免疫显像图像.
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ADAM15在舌癌耐药细胞系Tca8113/ADM表达的实验研究
目的 研究舌癌阿霉素(adriamycin,ADM)耐药细胞系Tca8113/ADM及其亲本细胞系Tca8113肿瘤转移相关蛋白去整合素-金属蛋白酶15(adamalysin15,ADAM15)的表达水平,从肿瘤耐药的角度对舌癌的耐药与ADAM15的关系进行初步探讨.方法 用蛋白免疫印迹技术检测Tca8113/ADM及Tca8113亲本细胞系的AD-AM15蛋白表达水平.结果 ADAM15在Tca8113亲本细胞系和Tca8113/ADM细胞系的表达分别为0.244±0.231和1.217±0.494,两者差异具有统计学意义(P =0.001).结论 肿瘤转移相关蛋白ADAM15在Tca8113/ADM细胞系的表达高于其在亲本细胞的表达,提示舌癌的阿霉素耐药细胞系的转移性可能比其亲本细胞更强.
关键词： 舌癌 ADAM15 Tca8113/ADM 耐药 蛋白免疫印迹法 -
去整合素金属蛋白酶15在乳腺癌组织中的表达及临床意义
目的：探讨去整合素金属蛋白酶15（a disintegrin and metalloproteinase 15， ADAM15）在乳腺癌组织中的表达及与患者临床病理特征的关系。方法：应用免疫组织化学 SP 法检测 ADAM15蛋白在65例乳腺癌中的表达情况，以30例乳腺良性病变作为对照。结果：ADAM15蛋白在乳腺癌中的阳性表达率（40/65，61．54％）显著高于乳腺良性病变（6/30，20％）（χ2＝14．181，P ＜0．01）。 ADAM15蛋白高表达与乳腺癌患者肿瘤大小（P ＝0．029）、淋巴结转移（P ＝0．020）和临床分期密切相关（P ＝0．040），而与患者年龄不相关（P ＝0．116）。结论：ADAM15蛋白在乳腺癌中表达升高，且与肿瘤大小、淋巴结转移和临床分期相关，可能成为判断乳腺癌恶性生物学行为的指标。
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解聚素金属蛋白酶在自身免疫性关节炎中的表达及与疾病活动的相关性研究
目的:探讨解聚素金属蛋白酶家族是否参与了自身免疫性关节炎的发病过程.方法:检测自身免疫性关节炎患者外周血单个核细胞中解聚素金属蛋白酶的表达,与疾病的炎症活动指标及标志性抗体进行相关分析,关节炎类型包括类风湿关节炎、系统性红斑狼疮关节炎和其他结缔组织病关节炎.结果:与健康对照者相比,解聚素金属蛋白酶在类风湿关节炎、系统性红斑狼疮关节炎和其他结缔组织病关节炎中均升高,疾病的活动性指标具有相关性.结论:解聚素金属蛋白酶家族参与了自身免疫性关节炎的发病.
