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  • 计算机辅助设计提高人NMDA受体主亚基M3-M4环在E.coli中的表达

    作者:张玉梅;孙长凯;范明;李伍举;赵杰;韩大跃;王吉庆;吴加金

    基于对螺旋区随机堆积的RNA二级结构的预测和密码子偏性计算, 建立了pBV220载体中外源基因高效表达的判别模型.该模型认为,外源基因的表达水平与其5′端-30~39区域,以及3′端30~-39区域的RNA二级结构自由能具有显著的统计学意义;其次与3′端9 bp的局部密码子偏性相关.据此模型,使用RNAfold和Goldkey软件优化改构设计了用于克隆表达人NMDA受体主亚基M3-M4环的引物.将PCR扩增的基因克隆入pBV220载体中,在大肠杆菌DH5α宿主中获得了高效表达(表达水平在20%以上).

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