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康柏西普与雷珠单抗对RF／6A细胞增殖和迁移影响的比较
目的：比较康柏西普与雷珠单抗对恒河猴脉络膜视网膜血管内皮细胞（ RF／6A cells）增殖和迁移的影响。方法将RF／6A细胞分为正常组、VEGF组、康柏西普组、雷珠单抗组、康柏西普＋VEGF组和雷珠单抗＋VEGF组。CCK-8法检测细胞增殖；Transwell小室检测细胞迁移；流式细胞仪AnnexinV-FITC／PI法检测细胞凋亡；Western blot检测蛋白AKT、p-AKT、P38MAPK及p-P38MAPK表达；实时定量PCR检测AKT mRNA和P38MAPK mRNA表达。结果1）与正常组比，同时间不同浓度药物组细胞增殖率呈浓度依赖性降低。确定药物浓度225μg／mL和培养24 h继续实验。2）与正常组比，VEGF组细胞增殖率高，迁移数目多，单药组增殖率低，迁移数目少；与VEGF组比， VEGF＋药组增殖率低，迁移数目少。3）与正常组比， VEGF组细胞凋亡率低，单药组凋亡率高；与VEGF 组比， VEGF＋药组凋亡率高。4）与正常组比，VEGF组磷酸化蛋白和mRNA表达高，单药组表达低；与VEGF组比，VEGF＋药组表达低。结论两药通过AKT和P38MAPK信号通路抑制RF／6A细胞增殖、迁移及相关蛋白的表达。
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姜黄素对高浓度葡萄糖培养的RF/6A的保护作用
目的 探讨高浓度葡萄糖对体外培养的恒河猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)的损伤及姜黄素对此的保护作用.方法 RF/6A为3组培养(n=6):对照组(DMEM完全培养基+10%胎牛血清),高浓度葡萄糖组(DMEM完全培养基+10%胎牛血清+30 mmol/L葡萄糖),姜黄素-葡萄糖组(DMEM培养基+10%胎牛血清+30 mmol/L葡萄糖+30 μmol/L姜黄素).以噻唑蓝(MTT)法检测分组培养1、3、5 d后各组细胞活力的变化,检测培养5 d后各组细胞丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 高浓度葡萄糖组RF/6A活力逐渐降低,呈现明显的时间依赖性,与对照组相比高浓度葡萄糖组RF/6A活性降低明显(P<0.01).姜黄素-葡萄糖组RF/6A活力无明显变化,与对照组无统计学差异(P>0.05).氧化应激水平检测显示,与对照组相比,分组培养5 d后,高浓度葡萄糖组MDA含量增加(P<0.01),SOD活力降低(P<0.01).姜黄素-葡萄糖组MDA含量及SOD活力均无明显变化(P>0.05).结论 姜黄素可抑制RF/6A氧化应激水平,防止高浓度葡萄糖对细胞造成损伤.
