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大鼠骨髓间充质干细胞旁分泌HGF上调肝星状细胞DR5及caspase-8的表达
目的 观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)对肝星状细胞(HSCs)死亡受体-5(DR5)及caspase-8的影响.方法 应用6孔培养板建立双层细胞共培养体系,分A组:对照组；B组:共培养组；C组:TNF-α预处理组；D组:HGF-ShRNA干扰组.ELISA法检测上清液中HGF及TRAIL的浓度；Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡；荧光定量-PCR、Western blot分别检测DR5、caspase-8 mRNA和蛋白的表达.结果 1)TNF-α预处理组中HGF的浓度明显高于BMSCs组及对照组(P＜0.01)；BMSCs组中TRAIL的浓度明显高于其他3组(P＜0.01).2)TNF-α预处理组中HSCs凋亡率明显高于其他3组且呈时间依赖性(P＜0.01)；HGF-ShRNA干扰组中HSCs的凋亡率低于共培养组,高于对照组(P＜0.01).3)共培养组及TNF-α预处理组DR5、caspase-8 mRNA及蛋白表达量明显高于对照组及HGF-ShRNA干扰组(P＜0.01).结论 BMSCs旁分泌HGF能上调DR5及caspase-8的表达促进HSCs的凋亡.
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实验性兔动脉粥样硬化病变中TRAIL、DR5的表达及意义
目的:探讨肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体(TRAIL)通过死亡受体-5(DR5)途径诱导的细胞凋亡与动脉粥样硬化(AS)的关系.方法:采用球囊拉伤腹主动脉加高胆固醇饮食的实验方法,建立兔AS模型;血管超声检查明确腹主动脉斑块的形成情况,然后取静脉血和腹主动脉组织,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测AS组及正常组兔血清中可溶性TRAIL(sTRAIL)和可溶性DR5(sDR5)的浓度,免疫组化染色检测AS组及正常组腹主动脉壁TRAIL和DR5的蛋白表达.并比较两组间各项参数的差异.结果:AS组兔血清中sDR5浓度显著高于正常组(P＜0.05),而两组兔血清中sTRAIL浓度差异无统计学意义(P＞0.05).AS组兔腹主动脉的TRAIL、DR5蛋白表达强度显著高于正常组(P＜0.05),染色呈棕褐色,粗颗粒状,群集于中膜、脂质沉积处和斑块纤维帽处,高倍镜下,棕褐色颗粒主要分布在胞浆和胞核内;正常组兔腹主动脉内膜、中膜也有少量TRAIL、DR5表达,染色呈浅棕色,颗粒细小,分布散在.结论:TRAIL通过死亡受体途径诱导的细胞凋亡对AS的发生和发展起一定的促进作用,TRAIL及其受体DR5可能是AS的重要影响因子.
关键词： 动脉硬化 肿瘤坏死因子相关细胞凋亡诱导配体 死亡受体-5 细胞凋亡 -
紫花牡荆素对人结肠癌SW480细胞生长和凋亡的影响
目的 观察紫花牡荆素(CAS)对人结肠癌SW480细胞生长和凋亡的影响.方法 体外培养人结肠癌SW480细胞,平皿克隆形成法测定细胞锚定依赖性生长能力,PI染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率,Western Blotting 分析CAS对上调死亡受体-5(DR5)、抑制核因子κB(NF-κB)(p65)蛋白表达的影响.结果 平皿克隆形成法检测显示CAS呈浓度依赖性抑制SW480细胞生长.PI染色FCM结果表明CAS呈时间和浓度依赖性诱导SW480细胞凋亡.Western Blotting检测显示CAS呈时间和浓度依赖性上调死亡受体-5(DR5)表达和抑制核因子κB(NF-κB)活性.结论 CAS具有抑制人结肠癌SW480细胞增殖和诱导凋亡的作用,其诱发结肠癌细胞凋亡作用与DR5表达和NF-κB活性有关.
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DFMG拮抗LPC诱导主动脉内皮细胞凋亡
目的 研究7-二氟甲氧基-5、4'-二甲氧基金雀异黄素(7-difuoromethoxy-5,4'-dimethoxy-genistein,DFMG)对溶血性磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine,LPC)诱导人主动脉内皮细胞(human aorta endothelial cells,HAEC)凋亡的影响.方法 体外培养HAEC.Annexin V/PI染色流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率.ELISA法测定Caspase-3、8和9活性.Western blotting分析细胞色素c和死亡受体-4、-5表达.结果 LPC(10μmol/L)处理HAEC 24 h,细胞凋亡率为(31.6%±4.1%)(P＜0.001).DFMG预孵育降低LPC诱导HAEC细胞凋亡率,Caspase-3、-8和-9活化及细胞色素C和死亡受体-5表达(P＜0.05).结论 DFMG拮抗LPC诱导HAEC细胞凋亡作用与阻断LPC激活死亡受体和线粒体凋亡途径有关.
