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  • BPI23-haFGF融合蛋白的鉴定及其生物活性研究

    作者:马艳;朱家勇;金小宝;刘雷山;王艳;李娟兰

    目的 研究BPI23-haFGF融合蛋白的生物学活性.方法 将已构建的酵母重组表达菌株pPICZαA-BPI23-haF-GF/X-33进行甲醇诱导表达,通过亲和层析纯化和冻十浓缩后,观察融合蛋白BPI23-haFGF埘细菌、NIH3T3细胞以及小鼠烫伤模型的作用.结果 获得纯度约90%的融合蛋白BPI23-haFGF,BPI23-haFGF具有杀菌及促增殖的双重功能,BP123-haFGF促增殖率与HaFGF标准晶相当,当其浓度为0.40 g/L时,促NIH3T3细胞增殖率高(88.7%);在小鼠烫伤模型中,用药组比阴性对照组提前2-3 d愈合.结论 融合蛋白BPI23-haFGF能够改善小鼠烫伤创面的愈合,为其在临床上的应用奠定了基础.

  • 不同细胞外泌体的分离与特性研究

    作者:李昕;刘瑜;尹宗宁

    目的 探究人肺癌细胞A549与小鼠黑色素瘤细胞B16-F10不同细胞外泌体的性质及促细胞增殖能力的差异.方法 采用超速离心法及ExoQμick试剂盒法提取A549细胞及B16-F10细胞培养上清液中的外泌体;利用透射电镜观察外泌体的形态,采用动态光散射法测定粒径,用SDS-PAGE电泳技术分析外泌体的蛋白分布,采用Western blot技术分析其特异蛋白TSG 101的表达,用MTT法测定外泌体促细胞的增殖能力.结果 超速离心法和ExoQμick试剂盒法均可用于提取外泌体,A549及B16-F10细胞外泌体均呈圆形膜性囊泡结构;提取的外泌体样本均有外泌体特异性标记蛋白TSG 101的表达,B16-F10细胞外泌体促细胞增殖能力更佳.结论 超速离心法分离的外泌体纯度高,促细胞增殖能力好.

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