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小鼠Lewis肺癌细胞非对称分裂细胞系的建立及其干性特征
目的 从小鼠Lewis肺癌细胞中分离建立非对称分裂细胞系,并初步鉴定其干性特征,为研究非对称分裂在癌症生物学中的作用奠定基础.方法 通过8次连续悬浮聚球,随后5次单细胞克隆的方法,从小鼠Lewis肺癌细胞亲代细胞(LLC-parental cells)中得到非对称分裂细胞系(LLC-ASD cells);通过Brdu标记的免疫荧光实验检测LLC-ASD cells中细胞非对称分裂;进行RT-qPCR、克隆斑成斑实验、单细胞琼脂球形成实验、单细胞克隆形成实验对比两细胞系干性特征;并通过同种小鼠肺部移植成瘤实验和裸鼠皮下成瘤实验分别对比两种细胞系体内转移和成瘤能力.结果 LLC-ASD cells的非对称分裂比例达50%.LLC-ASD cells的克隆斑、悬浮球形成数量和单细胞克隆形成率均分别高于LLC-parental cells(P<0.05),LLC-ASD cells原位种植转移能力较LLC-parental cells明显增强, LLC-ASD cells的裸鼠皮下接种致瘤能力也高于LLC-parental cells(P<0.05).结论 成功建立了小鼠Lewis肺癌细胞非对称分裂细胞系(LLC-ASD cells),并且它表现出了一定干性特征,为研究非对称分裂在肿瘤中的作用奠定了基础.
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Numb的研究现状及展望
细胞命运决定子(Numb),是一种膜相关蛋白分子,在细胞的非对称分裂中起决定作用.作为NOTCH通路的重要下调因子,其生物学作用与肿瘤相关受体NOTCH关系密切,在体内与NOTCH的相互作用共同控制着细胞分化/增殖的平衡,参与生物体内诸多重要的生理过程,并与多种恶性肿瘤的形成过程相关.笔者对Numb目前的研究现状进行综述.
