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成年大鼠纹状体区神经干细胞的分离培养
目的从成年大鼠纹状体区分离并鉴定神经干细胞. 方法利用无血清培养和单细胞克隆技术在成年大鼠纹状体区分离具有单细胞克隆能力的细胞群,选取单个克隆进行连续传代培养获得大量亚克隆,采用免疫荧光细胞化学技术检测神经上皮干细胞蛋白(Nestin)和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达. 结果从纹状体区分离的细胞群具有连续克隆能力,表达神经上皮干细胞蛋白,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原. 结论分离的细胞具有自我更新能力和多分化潜能,表达神经上皮干细胞蛋白,有很强的增殖能力.是中枢神经系统的干细胞.
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表皮干细胞鉴别与分离的研究进展
近年来,对干细胞的深入研究揭示了表皮主要由三种细胞成分组成:表皮干细胞(epidermalstem cells,ESCs)及其子代细胞--短暂增殖(transit amplifying,TA)细胞、有丝分裂后(post-mitotic differ-entiating,PMD)细胞.但由于尚未找到能够有效区别ESCs与TA细胞的方法,限制了以ESCs的分离及体外培养为基础的研究工作与临床应用.本文就ESCs的鉴别、分离方法的研究进展进行综述.
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BIOMED-2多重聚合酶链反应检测抗原受体基因重排在淋巴增殖性疾病诊断中的应用
目的 建立敏感而有效的检测免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)基因重排的方法,并探讨在淋巴增殖性疾病诊断和鉴别中的作用.方法 采用BIOMED-2多重聚合酶链反应,检测来自54例淋巴增殖性疾病患者的58份淋巴组织标本,分析抗原受体基凶重排状况及其克隆来源.结果 在88.0%(25份标本中22份)B细胞淋巴瘤/白血病和53.3%(15份标本中8份)T细胞淋巴瘤中检出Ig/TCR呈单克隆重排;在17例淋巴组织非恶性增殖患者的病理活检标本中,14例(82.4%)呈多克隆重排;在合格的57份标本中有44份(77.2%)的结果与终诊断相符.联合检测Igλ和TCRδ并未提高Ig/TCR单克隆重排的检出率,但可能有助于Igλ和TCRδ+淋巴瘤的诊断.结论 对于分析淋巴增殖性疾病,尤其是不典型病例的克隆来源状况,BIOMED-2多重聚合酶链反应检测抗原受体基凶重排是迅速、敏感而可靠的方法.
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新生大鼠神经干细胞的分离培养与分化
目的从新生SD大鼠脑室下区分离并培养神经干细胞,观察神经干细胞的生长、增殖及分化的特点.方法利用无血清培养和单细胞克隆技术,采用原代贴壁及传代悬浮的方法,培养获得细胞克隆.应用免疫细胞化学方法及透射电镜检测技术,鉴定神经干细胞和分化的神经细胞.结果从新生SD大鼠脑室下区分离的组织,经原代和传代培养均可形成细胞克隆,并具有增殖的能力.原代和传代细胞Nestin抗原呈阳性,分化后的细胞可表达NSE、GFAP、GC特异性抗原.结论本法从新生SD大鼠脑室下区分离的细胞具有自我更新和分化潜能,有很强的增殖能力,属于中枢神经系统的干细胞.
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克隆同源分析在头颈肿瘤中的应用
肿瘤的发生同人类肿瘤的克隆来源密切相关.了解肿瘤的克隆来源对于临床诊断及进一步治疗十分重要.单个体细胞经过有丝分裂形成一个克隆细胞群[1].目前学者们所接受的观点是多数肿瘤细胞都是单克隆细胞组成的,而肿瘤细胞发生的体细胞突变理论也认为单个体细胞在获得一个或多个突变后形成一个恶性表型,经过不断的繁殖形成肿瘤[2].
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神经干细胞的分离培养及其鉴定
目的:从成年大鼠纹状体区和胎鼠皮层分离并鉴定神经干细胞.方法:利用无血清培养和单细胞克隆技术在成年大鼠纹状体区和胎鼠皮层分离具有单细胞克隆能力的细胞群,选取单个克隆进行连续传代培养获得大量亚克隆,采用免疫荧光细胞化学技术检测克隆细胞Nestin抗原和分化后特异性成熟神经细胞抗原的表达.结果:从纹状体区和皮层分离的细胞群具有连续克隆能力,胚胎早期细胞抗原 Nestin抗原阳性,分化后的细胞表达神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的特异性抗原.结论:我们分离的细胞具有自我更新能力和多分化潜能,属于胚胎早期细胞,有很强的增殖能力,是中枢神经系统的干细胞.
