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坐骨神经源性弥散因子对成年青蛙再生轴突的定向诱导作用
目的 探讨损伤后周围神经产生的活性因子对活体成年青蛙断神经再生轴突的定向趋化诱导作用。方法 通过微型渗透压泵以不同的角度和距离朝被切断的支配左皮胸肌的神经末端提供坐骨神经条件性培养基(conditioned medium,CM)30～100kD组分，形成浓度梯度。28～32d后，取出胸部组织行免疫组织化学染色示再生的皮胸肌神经轴突，并分析再生轴突定向生长的导向值(directional value)。 结果 再生的皮胸肌神经轴突明显地朝向微型泵管口CM浓度梯度高处生长，导向值为0.84。对照组再生的神经轴突呈无定向生长，导向值为0.04。两组间有显著性差异(P<0.001)。管口与神经断端间距离和夹角的大小变化对导向值无显著性影响。 结论 损伤后的周围神经可产生分子量介于30～100kD可弥散活性因子，对活体成年青蛙断神经的再生轴突有定向诱导作用。
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Y27632条件培养基体外扩增口腔黏膜上皮细胞
目的：通过优化条件培养基用于非牙源性上皮细胞的体外扩增，为进一步开展组织工程牙提供上皮种子细胞来源奠定基础。方法：获取出生后1 d C57BL 鼠原代口腔黏膜上皮细胞，接种于含有 Y27632的上皮条件培养基的培养瓶内。细胞长满后，消化传代，采用条件培养基与3T3饲养层细胞共培养进行扩增并连续传代，观察细胞生长情况及连续传代后的生物学特性，免疫组织化学进行干细胞鉴定。结果：与传统上皮细胞培养方式相比，含 Y27632的条件性培养基加3T3饲养层方式培养的上皮细胞生长迅速，细胞呈立方形或多角形，呈铺路石样排列。免疫组织化学染色表明这些干细胞表达 CK14，SOX2和LGR5。连续传代至第7代后，细胞形态、生长曲线和干细胞标志没有明显变化。结论：含有 Y27632的条件培养基可有效用于体外大量扩增非牙源性上皮细胞，并能保持干细胞生长特性，有望用于组织工程牙的种子细胞来源。
