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渗透压变化对缝隙连接蛋白在培养的大鼠下丘脑星形胶质细胞和神经元表达的影响
目的观察渗透压改变对培养的下丘脑星形胶质细胞的缝隙连接蛋白Connexin43(Cx43)和神经元的缝隙连接蛋白Cx32表达的影响.方法体外培养孕14 d或新生1d SD大鼠下丘脑的神经元和星形胶质细胞并进行纯化和鉴定.实验各分两组,第1组:细胞由等渗培养液移至高渗培养液(含9% NaCl)分别放置1min、3min、5min、10min和15min后将液体吸出常规固定;第2组:细胞先置于高渗培养液中15min后换成等渗培养液,分别在1min、3min、5min和10min后将等渗培养液吸出常规固定.两者均进行抗Cx43或抗Cx32的免疫荧光染色,Confocal显微镜观察.结果第1组,Cx43在刺激1min后在星形胶质细胞表达比对照组有所增加,3 min达到高峰,以后逐渐降低,15 min恢复正常;而Cx32在刺激后1min的神经元中表达比对照组增加,5 min达到高峰,以后降低,15min恢复正常.第2组同样为Cx43在星形胶质细胞刺激1min后表达增加,3 min达到高峰,以后降低,10 min恢复正常;神经元的Cx32表达在刺激后5 min达到高峰,以后降低,10 min恢复正常.两组Cx43表达的高峰期均早于Cx32.结论Cx43和Cx32可能参与星形胶质细胞与神经元渗透压的调节.
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高渗盐水对运动性哮喘患者气道血管通透性的影响
运动性哮喘 (EIA)的机制目前尚不清楚,但认为其与运动后气道水分丢失局部渗透压升高有关[1],并认为部分原因是由于支气管微循环异常所致.为探讨局部高渗刺激后肺段内压力变化与肺血管通透性、25%～75%用力呼气流量/用力肺活量(FEF25%～75%/FVC)的关系,我们进行了相关实验研究.
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高渗刺激后大鼠视上核星形胶质细胞和神经元的反应及其相互关系的光、电镜研究
目的探讨大鼠尾静脉注射高渗盐水(9%NaCl,5.5 ml/kg)后,视上核(SON)内星形胶质细胞和神经元的可塑性反应及相互间的关系.方法用免疫组织化学和免疫电镜技术,观察刺激后15,45,90,180和360 minSON内缝隙连接蛋白43(Cx43)和蛋白32(Cx32)的变化及超微结构.结果光镜下观察到Cx43阳性星形胶质细胞在15 min出现,45 min达到高峰;Cx32阳性神经元90 min达到高峰.电镜下在SON内,观察到下列四种超微结构:(1)突触样结构(synapse like structure),位于神经元的轴突末梢与Cx43阳性的星形胶质细胞突起之间;(2)三成分的突触复合体(tripartite synaptic structure),由突触前膜、突触后膜和靠近此突触的星形胶质细胞突起共同组成;(3)同源性缝隙连接(gapjunction,GJ),位于星形胶质细胞突起之间,两侧均为Cx43;(4)"异源性缝隙连接样结构"(heterotypic gapjunctions,HGJ),是由Cx32阳性神经元和Cx43阳性星形胶质细胞突起组成的一种超微结构.结论高渗刺激后,SON内Cx43阳性星形胶质细胞和Cx32阳性神经元明显增加,前者出现和高峰的时间早于神经元;两者之间的HGJ数量明显增加,其他结构的数量变化不明显,因此两者可能是通过HGJ进行快速的信息交流.
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高渗刺激促进大鼠视上核酪氨酸蛋白的磷酸化
目的 研究高渗刺激对大鼠视上核酪氨酸蛋白磷酸化的影响.方法 成年SD大鼠随机分为高渗组和对照组(每组n=5),分别腹腔注射高渗盐水、生理盐水,2 h后用4%多聚甲醛灌注固定,取脑作30 μm冰冻切片,进行磷酸酪氨酸和c-Fos蛋白的免疫组织化学染色.结果 高渗组大鼠视上核神经元磷酸酪氨酸蛋白表达高于对照组(P＜0.01).结论 高渗盐水刺激促进视上核神经元酪氨酸蛋白的磷酸化.
