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8-Br-cAMP对人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞抑癌基因表达的效应
目的探讨8-Br-cAMP对人视网膜母细胞瘤之HXO-Rb44细胞抑癌基因表达的效应及其对细胞生长的影响. 方法应用原位杂交、RNA斑点印迹技术检测p16INK4 mRNA、p21WAF1 mRNA、wp53 mRNA、mp53 mRNA和Rb mRNA,应用免疫组织化学和蛋白质斑点印迹技术检测PCNA-IR、p21WAF1-IR、p16-IR、pRb-IR、cdk2-IR和cdk4-IR. 结果在人HXO-Rb44细胞内p16INK4mRNA、p21WAF1 mRNA、wp53 mRNA、mp53 mRNA及Rb mRNA位于胞质,p16-IR,p21WAF1-IR及pRb-IR主要位于胞核.在mRNA和蛋白质斑点印迹标本上,p16INK4 mRNA、p21waf1 mRNA、wp53 mRNA、Rb mRNA和p16-IR、p21WAF1-IR及pRb-IR的相对扫描数值均是实验组(经8-Br-cAMP处理)高于各自的对照组(未经8-Br-cAMP处理),P＜0.05～0.01;然而mp53 mRNA、PCNA-IR、cdk2-IR和cdk4-IR的相对扫描数值均是实验组低于对照组,P＜0.05～0.01. 结论 (1)8-Br-cAMP可抑制HXO-Rb44细胞的生长增殖;(2)8-Br-cAMP可上调抑癌基因的表达,包括p16INK4mRNA、p21WAF1 mRNA、wp53 mRNA、Rb mRNA及p16、p21WAF1、pRb的蛋白表达;(3)8-Br-cAMP可下调mp53 mRNA、PCNA-IR以及cdk2-IR和cdk4-IR的表达;(4)结果提示8-Br-cAMP可通过阻抑细胞周期进展相关基因的表达而抑制人HXO-Rb44细胞的生长增殖.
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8-Br-cAMP可上调人视网膜母细胞瘤HX O-Rb44细胞抑癌基因的表达
目的探讨8-B r-Camp对人视网膜母细胞瘤HXO-Rb44细胞抑癌基因表达的效应.方法应用RNA斑点印迹技术检测细胞p16、p21wafl、wp53、mp53和 Rb的Mrna,应用免疫组化斑点印迹技术检测细胞P16、P21wafl 、PRb、cdk2、cdk4和PCNA蛋白质表达的免疫反应性(IR).结果在斑点印迹标本上,人HXO-Rb44细胞p16、p21wafl、wp53及Rb 的Mrna信号和P16-IR、P21wafl-IR及PRb-IR均是实验组高于对照组,P＜0.05～0.01,而mp53mRNA信号、PCNA-I R、cdk2-IR和cdk4-IR均是实验组低于对照组,P＜0.05～0.01 .结论 8-Br-Camp上调人HXO-Rb44细胞p16、p21wafl、wp 53、Rb抑癌基因的表达及P16、P21wafl、PRb蛋白的表达, 并下调mp53mRNA、PCNA-IR、cdk2-IR和cdk4-IR的表达,提示8-Br-Camp可通过阻抑细胞周期进展相关基因的表达而抑制人HXO- Rb44细胞的生长增殖.
