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甘油二酯激酶ξ、蛋白激酶Cδ和Tis21在发育中大鼠脑的表达和定位
目的 探讨甘油二酯激酶ξ(DGKξ)、蛋白激酶Cδ(PKCδ)和Tis21在大鼠胚胎脑的时空表达模式以及与脑发育的关系. 方法 胚龄(E)9.5～ E18.5大鼠胚胎各5只,连续切片用于免疫组织化学方法检测DGKξ、p-PKCδ和Tis21在大鼠胚胎脑的表达;22只胚龄E11.5、E12.5、E14.5、E16.5和E18.5大鼠胚胎用于Westernblotting,检测DGKξ、磷酸化PKCδ(p-PKCδ)、PKCδ和Tis21在大鼠胚胎脑组织的表达.结果 免疫组织化学显示,于E9.5 p-PKCδ和Tis21在神经沟神经上皮呈阳性表达,DGKξ为阴性;E10.5 ～ E11.5,DGKξ、p-PKCδ和Tis21在脑泡壁均呈阳性表达;在E12.5三者均表达于端脑、间脑、中脑腹侧和脑桥处神经上皮,而中脑背侧、峡部和小脑原基仅DGKξ呈阳性表达,p-PKCδ和Tis21呈阴性;于E13.5三者沿海马、隔、苍白球及嗅脑呈阳性分布,在新皮质呈阴性,p-PKCδ和Tis21在峡部和小脑原基出现阳性表达;于E14.5 DGKξ表达延伸到新皮质,在脑的各个区域呈现出全阳性.而p-PKCδ和Tis21表达仅延伸到中脑顶盖,在新皮质仍为阴性;于E15.5 p-PKCδ和Tis21在新皮质出现阳性表达,在脑的各个区域均呈阳性;E16.5 ～ E18.5,三者在小脑和脑桥表达范围缩小;DGKξ和p-PKCδ可表达在神经上皮细胞的胞质,或胞质和细胞核.Western blotting显示,DGKξ和Tis21在E11.5 ～ E14.5表达逐渐增多,E12.5较E11.5显著增多,在E16.5和E18.5逐渐下降;p-PKCδ/PKCδ显示PKCδ活性变化趋势与DGKξ表达趋势一致.结论 DGKξ、p-PKCδ和Tis21时空表达与脑发育模式一致,DGKξ和p-PKCδ在神经上皮细胞的亚细胞分布提示它们主要通过DGKξ/Tis21和PKCδ/Tis21途径参与脑的发育.
