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  • 堆型艾美耳球虫cSZ1基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究

    作者:覃宗华;谢明权;蔡建平;艾哈迈德;叶秀华

    用PCR方法扩增堆型艾美耳球虫广东株子孢子表面抗原基因cSZ1的阅读框架(ORF),与质粒表达载体pYA3342连接后转化大肠杆菌E.coli X6212,获得阳性重组质粒后将其电转化至减毒鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)X4550.经IPTG诱导获得了cSZ1基因在减毒S.typhimurium的高效表达,表达产物占菌体总蛋白的9.2%,重组蛋白分子量约为19 kDa.将重组减毒S.typhimurium分别以108或109CFU/鸡经口免疫4日龄岭南黄肉鸡,免疫后两周血清中可检测到抗cSZ1的特异性IgG,3周时抗体水平达到峰值;25日龄时可在肠道检测到特异性IgA的分泌.免疫后3周,试验鸡分别经口攻击感染500个E.acervulina孢子化卵囊,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线;计数攻虫感染后第3.5~9.5天卵囊总产量,2个免疫组分别能降低25.1%和46.4%的卵囊产生.

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