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青蒿提取物对伯氏疟原虫超微结构的影响
采用4天抑制试验法,观察青蒿提取物和青蒿素对伯氏疟原虫超微结构的影响.结果显示,青蒿提取物和青蒿素均使原虫滋养体膜结构损伤,表现为虫体表膜、食物泡膜、限制膜、线粒体膜、内质网、核膜呈现肿胀及膜间隙增宽.有些虫体表膜、食物泡膜呈现多层螺纹膜样改变.严重病变的原虫滋养体退变崩解,结构消失,残留退变的食物泡和吞噬泡散在红细胞内.此外,还观察到青蒿提取物和青蒿素对疟原虫纳虫泡内裂殖子发育有抑制作用.试验证明,青蒿提取物和青蒿素对伯氏疟原虫滋养体的超微结构损伤部位和病变特征基本相同;并提示对疟原虫纳虫泡内裂殖子发育有一定影响.
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弓形虫致密颗粒蛋白结构功能及免疫
致密颗粒蛋白是弓形虫致密颗粒细胞器分泌的一类具有免疫活性的蛋白质,至少有10种.它们在修饰调理纳虫泡中起重要作用,并关联于泡内网络结构,参与虫体在细胞内的存活和复制.本文对目前有关致密颗粒蛋白与纳虫泡膜结构和膜网络之间的关系、致密颗粒蛋白免疫特性等方面的研究进展作一总结.
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弓形虫GRA7致密颗粒蛋白与宿主巨噬细胞蛋白的相互作用
目的 鉴定与弓形虫GRA7致密颗粒蛋白相互作用的宿主巨噬细胞蛋白组分,并研究蛋白相互作用与感染过程的相关性.方法 建立基于人源THP-1单核巨噬细胞系的弓形虫-巨噬细胞感染模型.以含GST标签的GRA7全长重组蛋白为诱饵,采用GST沉降体外蛋白相互作用方法,捕获与诱饵相互作用的人THP-1单核巨噬细胞系成分,采用液相色谱-两级质谱联用(LC-MS/MS)技术鉴定宿主靶蛋白.采用免疫共沉淀(Co-IP)方法验证其体内的相互作用.采用人碳酸酐酶1 (hCA1)抗血清为一抗的蛋白质印迹(Western blotting)验证捕获蛋白为宿主hCA1蛋白组分.采用pcDNA3.1(+)真核质粒过表达宿主靶蛋白的方法研究蛋白相互作用与弓形虫感染巨噬细胞的相关性.结果 GST沉降实验捕获的THP-1细胞蛋白组分主要为相对分子质量为Mr 29 000的蛋白,质谱鉴定为hCA1.Co-IP实验证明弓形虫GRA7蛋白与宿主hCA1蛋白在感染过程中具有显著体内相互作用.THP-1巨噬细胞内过表达hCA1基因可显著增强弓形虫的繁殖速度和纳虫泡形成速度,但不影响终繁殖数量.结论 弓形虫GRA7致密颗粒蛋白与THP-1巨噬细胞的hCA1蛋白具有显著蛋白相互作用,且该相互作用与弓形虫在THP-1巨噬细胞内的繁殖速度呈正相关.
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弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能及免疫原性研究的新进展
刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)可引起严重的人兽共患弓形虫病,给全世界经济造成巨大的损失,给公共卫生安全带来巨大的隐患.致密颗粒(dense granule)分泌的致密颗粒蛋白(dense granule proteins,GRAs)参与调节纳虫泡(parasitophorous vacuole,PV)及纳虫泡膜(parasitophorous vacuole membrane,PVM)的形成并能维持其结构稳定性,部分GRAs可参与宿主细胞的转录.近几年来,不断发现了多种新的GRA蛋白家族新成员,并随着对该家族成员研究的逐步深入,发现GRAs是研制抗弓形虫疫苗的候选分子之一.本文综述了弓形虫致密颗粒蛋白的生物学功能和免疫原性研究的新进展,旨在为研究弓形虫致病机理和研发新的抗弓形虫疫苗提供思路.
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刚地弓形虫侵入宿主细胞的机制
弓形虫是一种世界性分布的细胞内寄生原虫,其中间宿主范围广泛,能感染包括人在内的众多哺乳动物,目前尚无有效的防治方法.弓形虫入侵宿主细胞是一个连续、复杂的过程,包括在细胞表面和细胞外基质的滑移运动、附着和主动侵入宿主细胞,以及纳虫泡的形成,已经证明有许多成分参与这一过程.本文就这方面做一简要综述.
