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肾脏髓袢升支粗段CLC-K氯通道与巴特氏综合征
随着膜片钳和分子生物学等技术的应用,在肾髓袢升支粗段(thick ascending limb,TAL)发现了三种氯通道,但相关研究证实,在TAL表达多且在该部位离子转运过程中起主要作用的是CLC-K2,编码人类肾脏TAL的氯通道CLC-Kb的基因CLCNKB也被列为高血压候选基因之一,且与巴特氏综合征的发病密切相关,因此该通道已成为近年来的研究热点.本综述主要从CLC-K其功能、结构、电生理特性、调控以及与相关疾病巴特氏综合征之联系,介绍肾髓袢升支粗段CLC-K氯通道的研究进展.
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肾髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道研究进展
肾小管的钾通道分布于肾小管各段,既分布于管周膜,也分布于管腔膜,由于管周膜的膜片钳封接难度较大,故相关研究较少.但髓袢升支粗段(thick ascending limb,TAL)管周膜钾通道在肾小管的重吸收过程中是重要环节,对其研究具有重要意义.50 pS钾通道是近年来在肾髓袢升支粗段管周膜上发现的主要K+通道,本文对其功能、特点及调控等方面进行简要综述.
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桂竹糖芥苷对大鼠肾髓袢升支粗段管周膜50 pS钾通道活性的调控机制
目的:探讨桂竹糖芥苷对肾髓袢升支粗段(thick ascending limb,TAL)管周膜50 pS钾通道活性的调控机制.方法:采用细胞贴附式膜片钳技术及免疫印迹技术测定桂竹糖芥苷对50 pS钾通道活性的调控机制.结果:桂竹糖芥苷可明显抑制50 pS钾通道的活性(P＜0.01);PKC阻断剂存在时,桂竹糖芥苷不再增加50 pS钾通道的活性(P＞0.05).结论:桂竹糖芥苷可能是通过激活PKC依赖途径抑制50 pS钾通道活性的.
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桂竹糖芥苷对肾小管功能及髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道活性的影响
目的:探讨桂竹糖芥苷对肾小管功能及髓袢升支粗段管周膜50 pS钾通道活性的影响.方法:采用导尿法及细胞贴附式膜片钳技术测定尿量变化及对通道活性的影响.结果:桂竹糖芥苷可明显增加尿量,也可抑制髓袢升支粗段管周膜50 pS钾通道的活性(P＜0.01).结论:桂竹糖芥苷有利尿作用,而且这种利尿作用可能是通过抑制髓袢升支粗段管周膜50 pS钾通道活性实现的.
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腺苷类似物CHA对大鼠肾脏髓袢升支粗段中PKA及PLA2蛋白表达的影响
目的:探讨腺苷类似物CHA（环己基腺苷）对大鼠肾脏髓袢升支粗段(Thick ascending limb of Henle's loop,TAL)中PKA（蛋白激酶A）及PLA2（磷脂酶A2）蛋白表达的影响.方法:在髓袢升支粗段组织中加入10μmol/L的CHA,分别作用5min、15min、30min和lh,采用Western blot（免疫印迹）技术观察CHA对PKA及PLA2蛋白表达的影响.结果:CHA未能明显改变大鼠肾脏髓袢升支粗段中PKA及PLA2的蛋白表达(P＞0.05).结论:CHA在实验所用时间内不能改变PKA和PLA2的蛋白合成.
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蛋白激酶A激活和磷脂酶A2抑制参与腺苷对大鼠肾髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道的易化效应
本文旨在研究蛋白激酶A(protein kinaseA,PKA)和磷脂酶A2 (phospholipase A2,PLA2)在腺苷对髓袢升支粗段管周膜50pS钾通道刺激过程中的作用.解剖显微镜下分离髓袢升支粗段,膜片钳技术记录50 pS钾通道电流,免疫印迹技术测定PKA及PLA2磷酸化水平的蛋白表达情况.结果显示,环己基腺苷苷(cyclohexyladenosine,CHA,一种腺苷类似物)可增加50 pS钾通道的活性(P＜0.05).在PKA阻断剂H8的存在下,CHA不再增加50 pS钾通道的活性.在PLA2阻断剂AACOCF3存在下,CHA不再增加50 pS钾通道的活性.CHA可以增加髓袢升支粗段中PKA的磷酸化水平,而抑制PLA,的磷酸化水平(P＜0.01).在AACOCF3存在下,CHA依旧可以增加PKA的磷酸化水平(P＜0.01)；在H8存在下,CHA不再抑制PLA2的磷酸化水平(P＞0.05).以上结果提示,腺苷对髓袢升支粗段管周膜50 pS钾通道的刺激作用是通过先激活PKA,而后再抑制PLA2途径而实现的.
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髓袢升支粗段管周膜钾通道电流特性的研究*张成标1
目的 研究肾脏髓袢升支粗段管周膜钾通道的类型及其电流特征.方法 应用单通道膜片钳技术记录大鼠肾脏髓袢升支粗段管周膜钾通道电流.结果 在髓袢升支粗段上皮细胞的管周膜可记录到多种单通道钾电流.其中,50pS、70pS和100pS 3种钾通道占90%以上,不同类型钾通道的电流大小、开放概率及开放时间和关闭时间不同.结论 髓袢升支粗段管周膜存在不同类型的钾通道,这些通道具有不同的电流特性.
