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白血病患者异基因造血干细胞移植后T细胞免疫重建的研究
目的通过分析TCR Vβ基因片段选择性扩增,了解白血病患者异基因外周血干细胞移植后T淋巴细胞的免疫重建及其在移植物抗宿主病(GVHD)患者中的表达特点.方法采用RT-PCR扩增10例移植后患者外周血的单个核细胞的TCR Vβ 24个基因片段,分析其TCR Vβ基因的表达情况,GVHD患者的PCR产物进一步经基因扫描分析确定T细胞克隆性.结果经24个Vβ引物所分别进行的RT-PCR检测TCR Vβ各亚家族基因的表达情况,发现 10例病人外周血与正常人表达24个Vβ亚家族有明显的不同,病人的部分Vβ亚家族T细胞仍未能重建,仅表达5～22个亚家族基因;9例GVHD患者外周血仅表达2～8个TCR Vβ亚家族,其中7例均表达Vβ3.对6例GVHD患者的基因扫描显示,均存在克隆性T细胞生长.结论移植后病人外周血淋巴细胞TCR Vβ基因片段部分受抑制,部分基因片段呈选择性扩增.GVHD患者有Vβ3和Vβ8基因的优势表达,并有克隆性T细胞生成.
关键词： 白血病 异基因造血干细胞移植 T细胞免疫重建 TCR Vβ 基因 CD+3T细胞 -
胸腺近期输出功能与移植后T细胞免疫重建
造血干细胞移植的成功,有赖于T细胞免疫的重建.T细胞受体重排删除环(TRECs)是目前较可靠的反映胸腺近期输出功能的检测指标.定量检测TRECs水平可判断胸腺近期输出功能,评价移植后T细胞免疫重建情况.
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IL-22在小鼠胸腺受损后T细胞免疫重建中的作用研究
目的 探索γ射线照射诱导胸腺损伤后胸腺内IL-22表达水平的变化趋势,并研究IL-22在胸腺损伤后T细胞免疫重建中的作用.方法 建立非致死剂量γ射线照射诱导的小鼠胸腺损伤模型,分别设置正常对照组和全身照射(TBI)组,ELISA法检测小鼠胸腺及血浆中IL-22的含量;分别给予TBI组小鼠PBS或重组小鼠IL-22腹腔注射处理,设为TBI+PBS组和TBI+IL-22组,计数胸腺内总细胞和外周血白细胞含量,同时使用流式细胞术分析胸腺上皮细胞(thymic epithelial cells,TEC)、各阶段胸腺细胞以及外周血T细胞的含量,实时定量PCR分析胸腺中与TEC功能相关的基因Foxn1、Ccl25、Aire和Dll4的mRNA表达水平.结果 ①照射后小鼠胸腺内IL-22表达水平高于未经照射处理的正常对照小鼠(P值均＜ 0.05);②给予TBI组小鼠IL-22腹腔注射后,TBI+IL-22组小鼠胸腺内IL-22含量高于TBI+PBS组(P值均＜0.05);③照射后第14天,TBI+IL-22组胸腺内Foxn1、Ccl25、Aire和Dll4mRNA表达水平均高于TBI+PBS组(P值均＜0.05),同时,TBI+IL-22组胸腺总细胞计数[(5.93±3.19)×106/ml对(1.42±0.46)×106/ml,t=3.128,P=0.033]和外周白细胞计数[(3.08±0.94)×106/ml对(1.43±0.30)×106/ml,t=3.730,P=0.015]均高于TBI+PBS组.流式细胞术分析示,照射后第14天TBI+IL-22组小鼠胸腺内TEC和各胸腺细胞亚群含量均高TBI+PBS组(P值均＜0.05),照射后第7天和14天TBI+IL-22组外周血T细胞含量均高于TBI+PBS组(P值均＜0.05).结论 γ射线照射处理可导致小鼠胸腺内IL-22的含量升高,注射外源性IL-22可增加胸腺内IL-22含量.输注外源性IL-22可促进受损胸腺内TEC功能的修复,并增加各胸腺细胞亚群以及外周血中T细胞的数量.
