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  • 随机引物聚合酶链反应法鉴定2例无菌性脑炎的未知病毒

    作者:陈寅;严菊英;卢亦愚;茅海燕;张严峻

    目的 建立一种可应用于准确检测未知病毒的分子生物学方法.方法 2例无菌性脑炎患者的脑脊液,接种人横纹肌肉瘤细胞,收集感染细胞液,将细胞液离心去除细胞碎片,超速离心沉淀病毒颗粒后,用脱氧核糖核酸酶处理,提取核酸后,用随机引物进行聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)扩增,将扩增产物克隆至pGEM-T Esay载体中测序,序列通过BLAST(Basic Local Alignment Search Tool)终确定未知病毒.结果 经BLAST比对证明,该病毒是人类肠道致细胞病变孤儿病毒4型.结论 成功建立了一种基于随机引物PCR的未知病毒鉴定方法,为快速检测不明原因疾病和新发传染病病原提供了新的技术方法.

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