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MPT53文献资料
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结核分枝杆菌分泌蛋白MPT53基因的克隆、表达和纯化
目的 构建结核杆菌分泌蛋白MPT53原核表达载体并进行表达和纯化.方法 以结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组DNA为模板扩增MPT53基因,产物经纯化回收后与载体pMD-T连接转化,酶切鉴定,克隆到pET32a原核表达载体,测序鉴定插入序列完全正确者转化大肠埃希菌BL21,诱导表达MPT53融合蛋白,亲和层析纯化后,进行SDS-PAGE电泳鉴定.结果 成功构建PET32a-MPT53重组质粒,转化BL21后经IPGT诱导成功表达分子质量单位为36 ku的MPT53蛋白,与理论值相符.结论 成功表达结核分枝杆菌MPT53蛋白,为其应用打下了基础.
