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致密颗粒蛋白2(GRA2)文献资料
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弓形虫致密颗粒蛋白GRA2真核表达质粒的构建与体外表达
目的 构建弓形虫致密颗粒蛋白GRA2的真核表达重组质粒.方法 设计合成GRA2引物,运用PCR方法扩增其基因片段,经克隆至pMD18-T载体后,亚克隆至真核表达质粒pcDNA3.1(-)而构建重组表达质粒pcDNA3.1-GRA2.脂质体法将构建的重组质粒转染HFF细胞,RT-PCR法检测转染细胞中GRA2的表达情况.结果 PCR扩增GRA2基因序列正确,构建的重组表达质粒pcDNA3.1-GRA2经PCR、EcoRⅠ/HindⅢ双酶切和测序鉴定正确;转染GRA2基因的细胞,RT-PCR可见目的条带.结论 成功获得真核表达重组质粒pcDNA3.1-GRA2,为进一步研究弓形虫疫苗的免疫保护性奠定基础.
关键词: 弓形虫 疫苗 致密颗粒蛋白2(GRA2) 构建 表达