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幽门螺杆菌在两种液体培养基中生长规律的探讨
目的 分别用血清脑心浸液和β-环糊精脑心浸液两种培养基培养幽门螺杆菌,观察幽门螺杆菌在两种培养基中的生长规律. 方法 将幽门螺杆菌分别接种于血清脑心浸液和β环糊精脑心浸液中,置37℃微需氧环境以120 r/min震摇培养,于不同时间点以稀释平板计数法计数活菌数量,制作生长曲线. 结果 幽门螺杆菌在血清脑心浸液和β-环糊精脑心浸液中的迟缓期均为10h,对数期分别为45 h和40 h,对数中期时比生长速率分别为0.058/h和0.043/h,稳定期分别为15h和20 h,高浓度分别为2.067×108 CFU/ml和1.378×108 CFU/ml. 结论 幽门螺杆菌在血清脑心浸液和β-环糊精脑心浸液中均生长良好,其中在血清脑心浸液中高生长密度更大,对数期维持时间较长.
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一种简便的幽门螺杆菌液体培养法的构建
目的:建立一种简便、有效的幽门螺杆菌(H.pylori)的液体培养法.方法:取脑心浸液9 mL、胎牛血清1 mL、H.pylori选择剂(万古霉素、头孢磺啶、甲氧氨苄嘧啶及两性霉素B)400 μL制成H.pylori液体培养基,将H.pylori接种于H.pylori液体培养基,在厌氧罐中通过微需氧袋建立微需氧条件,于37℃振荡培养3d,同时设立传统固体培养基培养的H.pylori作为对照;观察2种方法培养的H.pylori生长状况及H.pylori形态,比较2种方法培养的H.pylori的尿素酶、氧化酶及触酶试验结果.结果:固体培养到第3天时,H.pylori生长良好,哥伦比亚血琼脂平板上见透明、针尖样菌落形态;液体培养第3天时可见培养基明显浑浊,涂抹少量菌液于无抗生素的哥伦比亚血琼脂平板培养,肉眼未见污染菌生长,并有透明、针尖样的菌落长出;革兰染色后,固体培养基中的H.pylori为螺旋状、海鸥状、S状弯曲菌或短杆菌;液体培养基中的H.pylori则多为螺旋短杆状、亦见部分长丝状细菌,有的互相缠绕聚集成团,有的散在分布;取两种方法培养的H.pylori菌进行尿素酶、氧化酶及触酶试验,结果均为阳性.结论:成功建立一种简便、有效的H.pylori液体培养法,细菌生长良好,且H.pylori形态变长.
