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登革热病毒SCID-LO2人鼠嵌合模型的建立与评价
目的 构建登革热病毒(DENV)感染的小动物模型,为阐明其致病机制提供实验材料.方法 `向严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠腹腔内接种人正常肝细胞(L02)构建“人鼠嵌合体”动物模型,进而腹腔注射DENV,通过检查病毒在体内分布和主要器官的组织学改变,对DENV感染的动物模型进行评价.结果 SCID小鼠成功移植LO2,并且嵌合小鼠感染DENV后出现病毒血症及严重的器官损伤等表现,但无后肢麻痹等无关症状.结论 成功构建了SCID-LO2人鼠嵌合模型,嵌合小鼠能够支持DENV复制,并表现出部分人类感染DENV的临床症状,该小鼠感染模型为研究DENV的致病机制提供了有价值的实验材料.
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MicroRNA－126对人正常肝细胞株脂代谢的影响
目的：探讨循环中MicroRNA－126在1型和2型糖尿病影响肝细胞的糖代谢及对正常肝细胞系 Chang liver细胞脂代谢的影响。方法以人正常肝细胞系为对象，设置MicroRNA－126 mimics转染组、MicroRNA－126 inhibitor转染组、阴性对照组、阴性对照抑制组、转染试剂组与正常对照组。通过转染 MicroRNA－126类似物及拮抗物，改变 MicroRNA－126表达。 RT－PCR法检测各组细胞中 MicroRNA－126的表达量；转染 MicroRNA序列48 h后，继而胰岛素作用12 h，甘油三酯（ TG）、胆固醇（ TC）定量检测试剂盒检测每组肝细胞内TG和TC的含量。结果 RT－PCR结果显示Mi－croRNA－126 mimics转染组较正常对照组的MicroRNA－126表达量显著增加（t＝26．18，P＜0．05），其余各组较正常对照组的MicroRNA－126表达量则无显著差别（P＝0．609）。胰岛素作用后，MicroRNA－126 mimics转染组、MicroRNA－126 inhibitor转染组、阴性对照组、阴性对照抑制组、转染试剂组与正常对照组相比，TG和TC含量无显著差别（F＝1．074，0．436，均P＞0．05）。结论 MicroRNA－126对正常肝细胞株TG及TC的代谢可能没有影响。
关键词： MicroRNA-126 人正常肝细胞株 脂代谢 -
MicroRNA126对人正常肝细胞株葡萄糖代谢的影响
旨在研究microRNA126过表达时人正常肝细胞株葡萄糖代谢的改变。体外培养chang liver细胞系,优化转染条件确定核苷酸序列的转染浓度后,分别转染microRNA126的类似物、抑制物及相应的对照序列。实时荧光定量PCR测定microRNA126相对表达量以检测细胞转染效率。转染48 h后,加入100 nmol/L胰岛素和对应底物处理2 h,检测各组葡萄糖利用率、糖原合成量、糖异生以及糖酵解指标。结果显示实时荧光定量PCR测定microRNA126类似物组microRNA126相对表达量明显高于其他各组( P<0.05)。 microRNA126类似物组与其他各组相比,人正常肝细胞葡萄糖利用率下降,糖原合成量减少,糖异生增强,乳酸生成量减少,丙酮酸激酶活力下降(均P<0.05)。 microRNA126在肝细胞过表达时,可影响细胞的葡萄糖代谢,可能增加肝糖输出。
关键词： microRNA126 人正常肝细胞株 葡萄糖代谢 糖尿病
