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应用原子力显微术表征细胞骨架形貌和测量中等纤维弹性模量的实验研究
引言细胞骨架是普遍存在于各种真核细胞和部分原核细胞内复杂的网架系统[1].据报道在某些疾病患者,如早老性痴呆症等的脑神经原细胞骨架中发现了大量扭曲变形的微管,仅有个别微管保持正常,这显示出了细胞骨架与细胞病理过程之间密切的关系,众多学者利用各种技术方法对其进行了广泛的研究.
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聚苯乙烯微孔板的表面修饰对酶免疫结果的影响
目的对聚苯乙烯板(PS)进行适当的修饰处理,以改善酶免疫分析的测定效果.方法以辣根过氧化物酶(HRP)为固相分子,用以观察酶与特异性底物之间的相互作用;用重组人增强肝脏再生因子(rhALR)、双链DNA(dsDNA)、心磷脂为包被抗原,以未氧化型与氧化型抗ALR为包被抗体,分别固定于不同修饰的PS板表面进行酶免疫分析,并与未经修饰处理的PS板作对比研究.结果生物分子的固定效果除与固相表面特征不同有关外,还与其本身的性质、所处的物理状态(包括分子的种类、结构、分子量大小和表面电荷等)密切相关.其中APTES与PLL修饰表面可显著改善rhALR、dsDNA、心磷脂抗原及氧化型抗体分子的固相化效果,提高酶免疫分析的吸光度值和测定敏感度.UV辐照PS板用于抗ALR和抗dsDNA抗体,醛基化表面(GA修饰)用于抗心磷脂抗体的测定亦可获得较高的特异信号显示与低背景噪音.AFM表征结果显示:疏水物理吸附的生物分子分布是随机和不规则的,且为聚集成团分布;而电荷引力与共价结合模式固定的生物分子空间取向与分布较为均一,可提高固定生物分子的数量和功能化保留程度.结论PS板经修饰处理后可改善对免疫分子的吸附能力,基于共价键和电荷引力结合模式可获得较为满意的酶免疫测试效果.
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原子力显微术的纳米尺度成像与表征功能在微循环研究中的应用
纳米科学打破了传统意义上的学科分类理念,以特定空间尺度范围的客观世界作为研究对象,开辟了具有鲜明特点的研究领域.其中,纳米尺度成像与表征技术的发展与应用是该研究领域的核心内容.本文介绍原子力显微镜(AtomicForce Microscopy,AFM)的成像原理和工作模式及其适用于生物样品的纳米表征、操纵及微加工技术功能,并将其纳米尺度成像与表征方法应用于细胞学和微循环研究的新进展,从新的视角提出对相关临床医学的新认识,为终实现"病台"与"实验台"的双重转化医学应用作出贡献.
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细菌波动生长过程的原子力显微镜观察
目的采用原子力显微镜对奇异变形杆菌菌落边缘的细菌排列及菌间关系进行观察.方法切取菌落边缘琼脂小块,将琼脂小块上的菌落轻轻印在云母片上,于原子力显微镜下观察.结果奇异变形杆菌波动菌落边缘细菌成单层紧密排列,菌体周围有大量鞭毛存在并在菌体之间耦合成束,菌体表面见到密集的蛋白颗粒.结论原子力显微术可在生理条件下原位观察活体细菌膜表面结构及菌体间相互关系,此方法操作简单,成像清晰且分辨率高.