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丙戊酸钠对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞Notch通路的影响
目的:探讨丙戊酸钠(VPA)对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞Notch通路中Notch1受体活性片段ICN1和靶基因Hes1表达的影响.方法:实验分为4组:空白对照组、VPA 2、4和8 mmol/L组,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测VPA对多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞的增殖抑制作用,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Notch通路中Notch1受体活性片段ICN1、靶基因Hes1 mRNA的表达,应用蛋白印记法(Western blot)检测ICN1、Hes1蛋白的表达.结果:同一时间、不同浓度VPA(0、2、4、8 mmol/L)处理RPMI 8226细胞,其细胞的生长明显受到抑制.相同浓度的VPA作用于RPMI 8226细胞不同时间(24、48、72 h)时,细胞的生长明显受到抑制.2、4、8mmol/L VPA处理48 h时与空白对照组相比,ICN1 mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),靶基因Hes1mRNA及蛋白表达水平均明显降低,(P<0.05).结论:VPA明显抑制多发性骨髓瘤RPMI 8226细胞的增殖,并且这种抑制作用在一定范围内呈时间-浓度依赖性(r =0.945).VPA可以下调Notch通路中Notch1受体活性片段ICN1、靶基因Hes1 mRNA及蛋白的表达水平,VPA可能通过抑制Notch信号通路实现对多发性骨髓瘤细胞的生长抑制作用.
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苦参碱抑制RPMI8226细胞增殖及对Notch通路的影响
目的 探讨苦参碱对RPMI8226多发性骨髓瘤细胞株增殖及对Notch信号通路的影响.方法 MTT法检测苦参碱对RPMI8226细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞周期;RT-PCR法和Western blot法检测Notch1受体胞内段ICN1、靶基因Hes1 mRNA和蛋白表达.结果 与对照组相比,苦参碱明显抑制RPMI8226细胞增殖(P<0.05),呈剂量和时间依赖关系(P<0.01);细胞周期检测结果示G./G1期细胞增多(P<0.01),S期细胞减少(P<0.01);ICN1、Hes1 mRNA和蛋白的表达水平均较对照组明显下降.结论 苦参碱可抑制骨髓瘤细胞株RPMI8226增殖,呈剂量及时间依赖性,并阻滞细胞于Go/G1期,可能是通过抑制Notch信号通路的活性而实现的.