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骨髓增生异常综合征患者骨髓中端粒保护蛋白TIN2和POT1的mRNA表达
本研究旨在探讨端粒保护蛋白TIN2、POT1的mRNA表达与骨髓增生异常综合征(MDS)发病的关系.采用实时荧光定量PCR方法检测51例初发MDS患者和10例正常人端粒保护蛋白TIN2和POT1的mRNA表达情况.结果表明,WHO分组中RA/RARS/RCMD/MDS-U、RAEB-1及RAEB-2组TIN2 mRNA的表达量均高于正常对照组,差异有显著性(P＜ 0.05)；RA/RARS/RCMD/MDS-U、RAEB-1及RAEB-2组POT1 mRNA的表达量均低于正常对照组,差异有显著性(P＜0.05).IPSS分组中,TIN2 mRNA的表达量在高危组、中危-2及中危-1均高于对照组,差异有显著性(P＜0.05),低危组与对照组间差异没有显著性；POTl mRNA的表达量在高危组、中危-2及中危-1均低于对照组,差异有显著性(P＜0.05),低危组与对照组间差异没有显著性.MDS中正常染色体核型患者TIN2 mRAN的表达量低于异常染色体核型的患者,与对照组相比差异没有显著性；MDS中正常染色体核型患者POT1 mRAN的表达量高于异常染色体核型的患者,与对照组相比差异没有显著性.结论:TIN2、POT1 mRNA的表达异常可能参与MDS患者端粒动力学的调节,引起MDS患者端粒长度的改变,进而导致疾病的发生.
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人POT1基因实时荧光PCR相对定量法的建立
目的:建立SYBR Green I实时荧光PCR定量检测人POT1基因的方法.方法:依据人POT1基因及参照基因TBP基因序列设计引物,以人类乳腺癌细胞系MCF-7总RNA逆转录合成的cDNA为模版,以TBP基因为参照基因,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测POT1基因的表达.结果:POT1和TBP基因熔解曲线为单峰,无杂峰及二聚体.POT1基因及参照基因TBP基因扩增效率相同(直线斜率0.0171＜0.1).POT1基因批内变异与批间变异分别为1.3%和2.1%;TBP基因批内变异与批问变异分别为1.2%和2.6%.结论:建立了SYBR Green Ⅰ实时定量检测人类POT1基因的方法,该方法简单快速,经济,灵敏度高,特异性和重复性好,可用于人类POT1基因的定量分析.
