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骨髓增生异常综合征相关基因表达研究
本研究探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者c-FLIPL,c-FLIPS及DLK1的表达水平及临床意义.应用逆转录-聚合酶(RT-PCR)半定量检测16例骨髓增生异常综合征患者及3例对照者(非恶性血液病患者)骨髓单个核细胞中c-FLIPL,c-FLIPS及DLK1 mRNA的表达水平.结果表明:DLK1 mRNA在MDS患者中表达明显高于对照组,包括RA及RAEB患者的表达量,均具有统计学差异(p＜0.05),而RA及RAEB患者之间的表达无统计学差异(p＞0.05);c-FLIPLmRNA在MDS患者中表达高于对照组(p＜0.05),其中RA及RAEB患者均明显高于对照组(P＜0.05),而RA及RAEB患者之间表达无显著性差异(p＞0.05);c-FLIPS mRNA表达在MDS患者中表达增高,但与对照组相比无统计学差异(p＞0.05),而RAEB患者的表达量明显高于RA及对照组,结果具有统计学差异(p＜0.05).结论:DLK1,c-FLIPL,c-FLIPS基因在MDS患者骨髓单个核细胞中表达存在异常,有些基因可以作为判断MDS发生、发展的一项指标.
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腺病毒介导c-FLIPs基因诱导淋巴细胞抗凋亡作用
目的探讨表达c-FLIPs重组腺病毒诱导淋巴细胞抗凋亡作用.方法采用RT-PCR方法,从人T淋巴细胞株的总RNA中克隆c-FLIPs基因;通过pAdeasy系统,构建表达c-FLIPs的重组腺病毒Ad.c-FLIPs;Hochest染色法及PI染色流式细胞仪检测anti-Apo-1诱导感染Ad.c-FLIPs后的H9细胞凋亡.结果采用RT-PCR方法从人T淋巴细胞株中扩增出c-FLIPs基因;构建重组腺病毒Ad.c-FLIPs;经Hoechst染色,荧光显微镜下观察细胞核的形态,结果发现,经anti-Apo-1诱导凋亡处理24 h后,未经Ad.c-FLIPs感染的H9细胞有大量的细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的凋亡细胞;Ad.c-FLIPs感染的H9细胞中细胞核呈浓染致密的固缩形态或颗粒状荧光的细胞数明显减少,大部分细胞染色质呈弥漫均匀低强度荧光;流式细胞仪分析经PI染色后的H9细胞,未经Ad.c-FLIPs预处理的H9细胞在anti-Apo-1作用24 h后,细胞的凋亡率分别为48.33%±7.41%;经Ad.c-FLIPs预处理1 d的H9细胞,其细胞凋亡率分别下降到3.60%±0.21%.结论重组腺病毒Ad.c-FLIPs可有效地诱导淋巴细胞的抗凋亡作用.
