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弥漫大B细胞淋巴瘤细胞系中bcl-6、lpp和miR-28基因表达的研究
本研究从基因和蛋白水平探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞系中Bcl-6、LPP和miR-28表达,及其之间的相互关系.应用Northern blot检测8个DLBCL细胞系(CTB-1、MD901、OC1-LY8、BEVA、RCK8、MD903、HRC57和K231)bcl-6和lpp的mRNA水平,液相杂交法检测miR-28表达,Western blot检测BCL-6和LPP的蛋白水平.结果显示,bcl-6基因易位类型涉及Ig基因细胞系(Ocl-ly8、MD903、CTB-1和MD901),其bcl-6 mRNA的表达较强,而在未涉及Ig基因易位的细胞系(HRC57和K231)中未见表达.lpp mRNA在CTB-1细胞系中表达阴性.miR-28在各细胞系中均有表达,表达强度高到低依次为:K231、CTB-1、MD903、HRC57、MD901、RCK8、OC1-LY8和BEVA.BCL-6蛋白在各细胞系表达由强到弱依次为:RCK8、BEVA、MD901、CTB-1、MD903、OC1-LY8、HRC57和K231;而LPP蛋白在K231细胞系中未见表达,余各细胞系表达由强到弱依次为:HRC57、OC1-LY8、BEVA、RCK8、CTB-1、MD901和MD903.各细胞系中bcl-6和Ipp mRNA水平与蛋白的表达并不一致,即高mRNA水平并不一定导致蛋白的表达增加.结论:不同DLBCL细胞系具有不同的BCL-6、LPP和miR-28蛋白表达水平,各细胞系中bcl-6和lpp mRNA表达水平与它们表达的蛋白量不平行,有关bcl-6、lpp和miR-28基因在DLBCL发生、发展中的作用机制有待进一步探讨.
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液相杂交检测B细胞淋巴瘤细胞系miR-28的表达
microRNA(而RNA)是一组在进化上高度保守、非编码蛋白、参与转录后调节的小分子RNA(19-25核苷酸).为了进一步明确miRNA的加工机制及功能和定量研究miRNA的表达水平,应用液相杂交和Northern blot两种方法检测miR-28在B细胞淋巴瘤细胞系中的表达并进行了比较.结果表明:液相杂交和Northern blot检测miR-28均显出阳性结果,但液相杂交所用的细胞总RNA量(5μg)明显少于Northern b1ot(30μg),液相杂交的条带信号也较Northern blot的强.结论:液相杂交是一种较Northern b1ot更为快速、简便和敏感的检测miR-28的方法.
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miR-28在肿瘤转移中的研究进展
miRNA是生物体内一类长度为19～25个核苷酸的非编码小分子单链RNA,通过跟目的基因mRNA的3'端非编码区互补配对,使mRNA直接降解或发生转录后翻译抑制,从而影响目的蛋白表达,调控细胞的凋亡、增殖与分化等生物学行为.研究发现miR-28在很多肿瘤中有差异表达,其与肿瘤细胞的增殖、凋亡、迁移、侵袭等生物行为密切相关.因此miR-28有望成为肿瘤早期诊断的指标,甚至是肿瘤治疗的新靶点.本文就miR-28在肿瘤转移机制中的作用做一综述.
