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组织培养用于小鼠胚胎AGM区造血发育的研究
本研究通过建立组织培养方法探讨小鼠胚胎主动脉-性腺-中肾区(AGM)区造血发育规律.选取小鼠胚胎AGM区作为实验对象,体外组织培养2天后,应用集落形成实验观察髓系祖细胞的数量,应用体内移植考察CFU-S1l和造血干细胞的发育.结果表明:组织培养后的AGM区细胞仍然具有形成髓系集落的能力;每个胚胎期10.5天(E10.5) AGM区在致死剂量照射的成年小鼠脾脏中可形成10.8±3.5个CFU-S11.更重要的是,经组织培养的E10.5 - E11.5 AGM区能高比例(85.7%)、高嵌合[(51.12±21.17)%]、长期(>4个月)重建受致死剂量照射的成年小鼠的造血系统,在受鼠的外周血、骨髓、脾脏、胸腺中均能检测到供体来源的淋系或髓系祖细胞嵌合.结论:应用本研究建立的组织培养体系可对正常或基因突变胚胎AGM区中的多种造血起始细胞(尤其是造血干/祖细胞)进行发育动力学研究.
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小鼠造血干细胞增殖与分化性能的研究
本文选择Y染色体特异的性别决定基因(Sry)作为新的细胞遗传标志,采用PCR技术研究了小鼠造血干细胞的增殖与分化性能.将雄鼠骨髓细胞输注给经致死剂量射线照射的雌性受体小鼠,PCR测试结果表明,所有CFU-S均为供体起源.供体来源的CFU-S在其输入体内后,可通过增殖、分化形成各系造血细胞;但CFU-S中的纤维母细胞和CFU-S重建造血后受体小鼠骨髓中的纤维母细胞均为受体起源.由此可见,小鼠骨髓中的CFC-S是一类造血干细胞,它不具有分化为纤维母细胞的性能.
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钩吻对小鼠造血功能的影响
目的:观察钩吻对小鼠造血功能的影响.方法:利用环磷酰胺(Cy)抑制骨髓及辐照致骨髓损伤造模,检测钩吻对Cy所致骨髓抑制小鼠外周血细胞,红细胞,血小板,脾重和骨髓有核细胞的影响及对辐照致骨髓损伤小鼠CFU-S的影响和对小鼠生存的保护作用.结果:钩吻对Cy骨髓抑制小鼠外周血细胞、红细胞、血小板及骨髓有核细胞均有明显提升作用(P<0.01),并显著提高生存率(P<0.05)和CFU-S数(P<0.01),而对脾重影响差异无显著性(P>0.05).结论:钩吻对抗肿瘤药物及放射线所致的骨髓抑制和/或损伤动物的造血功能有保护作用.
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rhGM-CSF/IL-3融合蛋白对小鼠造血功能的影响
目的:观察重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-3(rhGM-CSF/IL-3)融合蛋白对小鼠造血功能的影响.方法:利用环磷酰胺(CTX)抑制骨髓及辐照致骨髓损伤造模,检测rhGM-CSF/IL-3对CTX所致骨髓抑制小鼠外周血WBC、RBC、血小板、脾重、骨髓有核细胞(BMC)的影响及对脾集落形成单位(CFU-S)的影响和对小鼠生存的保护作用.结果:rhGM-CSF/IL-3对CTX骨髓抑制小鼠外周血WBC、R13C、血小板及BMC均有明显提升作用(P<0.01),并显著提高生存率(P<0.05)和CFU-S数(P<0.01),而对脾重影响差异无显著性(P>0.05).结论:rhGM-CSF/IL-3有减轻骨髓损伤和促进造血干/祖细胞增殖和分化的作用.
关键词: rhGM-CSF/IL-3 RBC WBC CFU-S 骨髓抑制