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大茶药中毒样品中钩吻生物碱的快速检测
梅州山区常有误食大茶药类植物煲汤引起食物中毒的事件发生,因此必须建立一种快速、简便的钩吻生物碱检测方法,以便为抢救中毒者提供实验室依据.取引起食物中毒的汤料植物,用0.3 mol/L醋酸溶液浸泡后,浸泡液调至碱性,用乙醚提取,挥干乙醚后,残渣用"重铬酸钾-硫酸反应"和"钒硫酸反应"进行定性检测,同时用已知可食用的植物(马蓝等)做阴性对照.在几起此类食物中毒事件中,汤料植物均检出钩吻生物碱.本法操作简便,试剂易得,结果易于辨别,不需使用贵重仪器,适合在基层疾病预防控制中心检验室推广使用.
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GC/MS测定断肠草中钩吻碱方法研究
目的 建立气相色谱-质谱联用仪法检测断肠草中钩吻碱的方法.方法 试样经碱液振荡和超声提取后,用三氯甲烷萃取,用毛细管柱HP-5MS进行分离,采用电离方式(EI),气相色谱/质谱联用仪检测断肠草的钩吻碱含量.结果 方法检出限为0.2mg/kg;回收率84.2%~92.6%,相对标准偏差小于5%.结论 本方法简便、准确、灵敏度高,重现性好,适用于食物中毒样品的定性和定量分析.
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贵州省一起钩吻引起的食物中毒调查
目的 查明引起本次食物中毒的原因,有针对性地采取有效措施.方法 对参加聚餐者及事故相关人员以及引起食物中毒的危险因素进行调查,采集可疑中毒物样品进行分析鉴定.结果 饮用过植物泡制药酒的男性11人全部发病,饮酒量为0.1～0.2 kg/人,潜伏期为10 ～ 20 min,饮酒量多者发病更快、病情更重.死亡5例,病死率为45.46％,未饮酒者无人发病.经鉴定,泡制药酒的原料为钩吻.结论 此次为有毒植物钩吻引起的食物中毒事故.
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钩吻非生物碱类化学成分研究
目的:对钩吻 Gelsemium elegans的非生物碱类化学成分进行研究.方法:采用不同柱色谱技术进行分离,通过波谱分析确定化合物结构.结果:分离鉴定了10个化合物,其中3个酚酸类化合物,2个黄酮类化合物,2个香豆素,2个果糖衍生物,1个核苷类化合物.分别为tamarixin(1),tamarixetin 3-O-β-D-galactopyranoside(2),东莨菪苷(3),东莨菪内酯(4),尿嘧啶核苷(5),咖啡酸(6),咖啡酸乙酯(7),阿魏酸乙酯(8),乙基-α-D-呋喃果糖苷(9),和乙基-β-D-吡喃果糖苷(10).结论:化合物1～3,5～10均为首次从该植物中分离得到,其中化合物1,2,5～10为首次从该属植物中分离得到.
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钩吻地上部分的化学成分
目的:研究钩吻Gelsemium elegans地上部分的化学成分.方法:运用各种柱色谱方法和半制备型HPLC技术进行分离纯化,并根据NMR,MS等波谱方法和理化数据对化合物进行结构鉴定.结果:从钩吻中分离鉴定了16个化合物,其中9个生物碱类成分,koumine(1),gelsenicine(2),19-(Z)-akuammidine(3),gelsemoxonine(4),gelsemine(5),gelsevirine(6),humantenine(7),11-methoxygelsemamide(8)和gelegamine D(9);3个megastigmane型苷类化合物,(3R,5S,6S,7E,9R)-me-gastigman-7-ene-3,5,6,9-tetrol-9-O-β-D-glucopyranoside(10),(6R,7E,9R)-9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one-9-O-[α-L-arabinopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside](11)和(6s,7E,9R)-6,9-dihydroxy-4,7-megastigmadien-3-one-9-O-[α-L-arabinopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside](12);2个黄酮碳苷,荭草素(13)和异荭草素(14);1个环烯醚萜苷,獐牙菜苷(15);1个果糖苷,正丁基-α-D-呋喃果糖苷(16).结论:化合物10～16均为首次从钩吻属植物中分离得到.
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钩吻中毒的机制、临床特点及处理
钩吻是毒性极强的外用中药,应用不当或误服可致中毒,有时还可致命.主要毒性成分是钩吻碱,以钩吻素子含量高.钩吻中毒主要抑制延髓呼吸中枢,并抑制脑和脊髓的运动中枢.临床表现以呼吸系统、神经系统症状为主,可出现呼吸衰竭和呼吸肌麻痹,是钩吻中毒常见的死因.目前尚无特效解毒剂,以对症支持治疗为主.洗胃时须注意监测呼吸情况,必要时先行气管插管再洗胃.
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《金匮要略》中钩吻的本草考证
通过历代文献考证和现代植物学的研究,对<金匮要略>中钩吻的原植物来源进行考证,确定书中记载钩吻应为伞形科植物毒芹Cicuta virosa L或毛茛属毛茛Ranunculus japonicus Thunb.、禺毛茛R.cantoniensis DC.、扬子毛茛R.sieboldii Miq.和茴茴蒜R.chinensis Bunge.等一类植物.
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钩吻的化学成分研究
目的 研究马钱科胡蔓藤属植物钩吻Gelsemium elegans的化学成分.方法 采用硅胶、Sephadex LH-20、HPLC等色谱方法进行分离纯化,通过理化性质及核磁共振谱学数据对分得的化合物进行结构鉴定.结果 从钩吻的95％乙醇提取物中分离得到15个化合物,分别鉴定为钩吻素子(1)、钩吻素甲(2)、钩吻绿碱(3)、钩吻素己(4)、花椒毒素(5)、香柑内酯(6)、异茴芹内酯(7)、欧前胡素(8)、蛇床子素(9)、对羟基苯甲酸(10)、香草酸(11)、β-谷甾醇(12)、β-胡萝卜苷(13)、钩吻内酰胺(14)、16-表伏康树卡平碱(15).结论 化合物5～9为首次从该种植物中分离得到.
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1-甲氧基钩吻碱抗慢性疼痛作用
目的 1-甲氧基钩吻碱对福尔马林足底注射所致炎性痛及小鼠坐骨神经慢性压榨性损伤(CCI)所致神经病理性疼痛的作用.方法 建立小鼠福尔马林炎性疼痛模型,以注射福尔马林后l h内小鼠舔足时间为指标.观察1-甲氧基钩吻碱对炎性痛第二相痛反应的影响;建立小鼠CCI模型,于术后第3天至术后第9天sc 1-甲氧基钩吻碱,每天2次,连续7 d,以双足热痛缩足潜伏期比值为指标,观察1一甲氧基钩吻碱对小鼠足底热痛缩足潜伏期的影响.结果 1-甲氧基钩吻碱具有显著对抗小鼠福尔马林致炎性疼痛第二相痛反应作用,作用争剂量依赖性,ED50为4.59 mg/kg.1-甲氧基钩吻碱具有显著的抗CCI小鼠热辐射痛敏的作用,镇痛效应呈剂量依赖性;高剂量组小鼠给药后2 d显效,镇痛疗效持续至停药后36 h;术后第9天,1-甲氧基钩吻碱镇痛效应ED50为3.84 mg/kg.结论 1-甲氧基钩吻碱具有抗炎性疼痛作用与抗神经病理性疼痛作用.
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人血浆中钩吻素甲和钩吻素子HPLC-UV测定
目的 建立HPLC法测定人血浆中钩吻素甲(GM)和钩吻素子(KM)的浓度.方法 用Waters HLB-SPE固相萃取小柱提取人血浆中GM及KM.色谱柱为Shim-Pack C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5 μm);流动相为甲醇-水-二正丁胺(58∶42∶0.01);体积流量1.0 mL/min;进样量50μL;柱温30℃;检测波长263 nm.结果 GM和KM在0.05～20tg/mL线性关系良好,低定量限为50 ng/mL (S/N≥10),GM和KM的平均提取回收率分别为90.88％、87.84％,平均方法回收率分别为98.65％、96.31％,平均日间精密度RSD分别为9.81％、10.63％,平均日内精密度RSD分别为7.79％、8.24％.含GM和KM的人血浆在室温25℃避光的条件下保存12h、在4℃冰箱保存2d、在-20℃冰箱保存15d、-20℃冰箱反复冻融3次的条件下,低、中、高3个质量浓度(0.05、5.0、20 tg/mL)的GM和KM回收率均在90％以上.结论 建立的人血浆中GM和KM的HPLC测定方法灵敏度高、血浆用量少、操作简便、结果准确可靠,适用于钩吻制剂药动学研究和钩吻中毒时定性和定量分析.
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钩吻中毒8例诊治分析
目的：探讨钩吻中毒的诊治方法。方法：分析2003年8月本院救治的8例钩吻集体中毒患者临床资料。8例患者入院后均予清水洗胃，禁食，给予西咪替丁保护胃粘膜，预防消化道出血，呼吸困难者及时吸氧，症状无改善或进行性加重者立即行气管插管，表现为阿托品中毒样症状时予新斯的明1mg肌注，表现为毒蕈碱样症状时予阿托品0.5mg静注，必要时重复给药至症状消失。同时给予细胞色素C、三磷酸腺苷、辅酶A静滴营养脑细胞及心肌，速尿利尿排毒，纠正水电解质酸碱平衡及对症支持治疗。结果：（一）临床表现：主要表现为口角流涎、恶心、呕吐、腹痛、咽喉梗阻感、面色潮红、苍白、烦躁不安、视物不清、复视、牙关紧闭、步态不稳、尿潴留等。其中2例重症者出现呼吸肌麻痹，呼吸骤停。体格检查：血压正常4例，血压降低4例，神志模糊6例，谵妄2例，瞳孔散大4例，缩小2例。颈软，心率在110～140次/min4例,心率40～50次/min3例，肺部检查正常。腹部压痛4例，肝脾不大。神经系统未引出病理征。实验室检查：血钾、钠、氯均降低。（二）治疗结果：8例患者中2例重症病人出现呼吸骤停立即给予人工呼吸，胸外按压等抢救处理后呼吸恢复。5例患者住院3天痊愈出院，3例5天痊愈出院，随诊一月各项检查无异常。结论：钩吻中毒病情危重，临床症状复杂多样，早期诊断、及时采取综合的抢救方法是救治成功的关键。
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钩吻化学成分及临床应用研究进展
通过查阅大量相关文献，对钩吻的化学成分的含量测定及鉴别方法、药理作用等方面对钩吻化学成分的研究进展进行阐述。
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羊血治疗2例钩吻中毒病人的抢救护理
钩吻为马钱科植物胡蔓藤的全草,是世界著名的剧毒植物,<神农本草>中将其列为下品.其所含钩吻素已被认为是国内已发现生物碱中毒者[1].钩吻对人的毒性,除了引起胃肠道症状外,对神经系统毒害甚大,病人表现为瞳孔散大,视物不清,并产生幻视、复视,严重者呼吸中枢受抑制、麻痹、呼吸肌周围神经的麻痹而引起窒息死亡.救治钩吻中毒病人多采用对症支持治疗,但成功救治率不高.民间有用新鲜羊血救治的记载[2].山羊血是一种较好的活血散瘀、通络、解毒药.山羊血成分为多种蛋白质,尚含少量脂类(磷脂和胆甾醇)、葡萄糖及无机盐等,但其解毒的具体机制不清[3].我院收治2例因自食钩吻草中毒的病人,经及时予以羊血清抢救后痊愈出院.现介绍如下.
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金银花与钩吻的鉴别与使用
金银花原名忍冬花,<名医别录>列为上品.据近代药理实验和临床应用证实,金银花对于多种致病菌有较强的抗菌作用,对于各种炎症、菌痢均有较好的治疗效果.金银花的产量较大,分布较广,使用历史较久.产于山东的量大,习称"东银花",产于河南的质佳,习称"南银花"或"密银花" [1].药食同源,现代常用金银花泡茶饮用.而现实生活中有将剧毒草药钩吻误认为金银花而误食者.现从以下五方面来鉴别使用金银花与钩吻.
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钩吻民间应用调查及不同动物血解其毒实验研究
目的:文献研究和民间调查钩吻的临床应用,并探讨解钩吻毒的实验研究.方法:取新鲜羊血、猪血、鸭血及与钩吻总碱的混合液,根据Dm的TAG灌胃给药小鼠的解毒量效关系与特异性,观察小鼠中毒及死亡情况.结果:当羊血与TAG低全部致死量给药体积为4∶1时,小鼠能全部存活,比例再低时出现小鼠死亡现象.猪血和鸭血也存在解钩吻毒的效力,羊血解钩吻毒缺少特异性.结论:(1)民间存在应用钩吻防治恶性肿瘤、肝硬化腹水及部分关节病变的现象,并具有一定疗效.(2)羊血、猪血、鸭血解钩吻毒是客观存在的.
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钩吻生物碱成分的研究进展
目的 对钩吻中生物碱成分的研究进展进行综述,为钩吻生物碱成分的进一步研究奠定基础.方法 查阅国内外相关文献47篇,从其中化学成分的理化常数、结构式、提取分离方法、药理作用、毒性以及开发前景等方面对钩吻生物碱类成分的研究进展进行综述.结果与结论 钩吻中含有生物碱成分44种,主要为吲哚类生物碱;主要提取分离方法为硅胶柱层析和重结晶;钩吻生物碱具有免疫调节、抗肿瘤、镇痛镇静等药理活性;钩吻中的毒性成分也为生物碱类成分,这给广大研究人员带来了严峻的挑战与机遇.
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基于谱效关系的钩吻炮制减毒存效的实验研究
目的:研究砂炒钩吻的减毒存效的工艺及镇痛药效.方法:采用烘烤箱高温加热法,以镇痛药效、急性毒性为评价指标,在单因素试验基础上,选择炮制时间、炮制温度为自变量,采用星点设计-响应面法优选钩吻炮制工艺的研究.结果:钩吻在190～ 230℃温度下,经过10～ 60 min的炮制后,毒性明显降低,且保留一定的镇痛效应.对炮制品的外观、毒性和镇痛药效综合考虑,在炮制温度200～220℃,炮制时间在10～20 min内进行佳工艺优选,得到钩吻的佳炮制工艺:炮制温度210℃,炮制时间15 min.在此条件下进行验证性实验,结果与实验预测值较为接近,说明采用响应面法得到的工艺参数可靠,具有一定的实用价值.结论:砂炒钩吻炮制后毒性明显降低,同时又保留良好的镇痛药效,取得了良好的预期结果.
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钩吻的研究概况
中国钩吻已分离出17种单体,其中以钩吻素予含量高,钩吻素己毒性强.毒理作用主要押制呼吸中枢,作用于迷走神经.其临床作用已从过去的仅供外用发展为用于抑制肿瘤细胞生长、治疗神经痛、扩瞳、免疫调节等方面.
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钩吻生物碱的提取分离及结构鉴定
中草药钩吻中具有抗癌活性生物碱单体成分的提取分离,并测定其结构.方法:药材粉碎后用3% NaOH碱化后,晾干,用氟仿浸泡,回收氯仿提取液得浸膏.加酸溶解后,用氯仿萃取,碱化水层,再用氯仿萃取,得到钩吻总生物碱.然后经硅柱层析、反相ODS柱层析以及制备型HPLC层析分离纯化,并经理化性质和光谱学数据的测定鉴定单体化合物的结构.结果:共分离得到12个单体化合物,经测定紫外光谱,1H-NMR数据并与文献报道相比较,初步确定两个化合物的结构分别为gelscmine和kouminv.结论:通过硅胶柱层析,ODS柱层析和HPLC相结合的方法可以达到分离钩吻总生物碱的目的.
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正交试验优化钩吻生物碱回流提取工艺
目的 采用正交试验优化钩吻生物碱回流提取工艺.方法 以生物总碱提取率、钩吻素子和钩吻素甲含有量为评价指标,乙醇体积分数、料液比、氢氧化钠溶液质量分数、提取时间为影响因素,正交试验优化提取工艺.结果 佳条件为乙醇体积分数75％,料液比1∶11,氢氧化钠溶液质量分数3.5％,提取时间1.5h,生物总碱提取率1.015％,钩吻素子和钩吻素甲含有量分别为33.512mg/g和21.431 mg/g.结论 该方法简单、省时、高效,可用于回流提取钩吻生物碱.
