首页 > 文献资料
-
凝血因子Xa促进巨核细胞系Meg-01分化
目的:探讨凝血因子Xa在成巨核细胞白血病细胞Meg-01分化为血小板样颗粒中的作用及其机制.方法:以Meg-01细胞作为实验对象,凝血因子Xa作为激动剂,采用CCK-8法检测Meg-01细胞增殖活性,采用Alam-aBlue试剂盒分析血小板样颗粒活性,用Western blot检测MAPK/ERK和PI3 K/AKT信号通路,采用Western blot和流式细胞术检测巨核细胞分化标志蛋白CD41b的表达,流式细胞术检测细胞周期变化和细胞凋亡情况.结果:凝血因子Xa抑制Meg-0l细胞的增殖,促进其凋亡.凝血因子Xa触发细胞G2/M期阻滞并下调SKP2蛋白表达,凝血因子Xa上调CD41b的表达并激活MAPK/ERK和PI3K/AKT通路,Meg-01细胞经凝血因子Xa刺激后产生了有活性的血小板样颗粒.结论:凝血因子Xa可能在巨核细胞分化为血小板的过程中发挥一定的作用.
-
连翘苷D和凝血因子Xa相互作用的分子动力学模拟
目的 阐明连翘苷D(FTD)与凝血因子Xa(FXa)活性位点的动态相互作用过程,为设计新药提供参考依据.方法 利用FXa蛋白与其原始配体(RPR)的合理复合物结构作参照物,通过对接获得了FTD与FXa的复合结构.采用分子动力学方法模拟了两个复合物在水溶液中500 ps运动轨迹,考察配体与受体在动态相互作用过程中的变化过程.结果 RPR依靠氢键作用与受体S1区域和中同部保持稳定的匹配状态,以非极性的芳香基与S4区域(Tyr99、Phe174、Trp215)形成了很好的空间匹配.FTD与受体相互作用方式不同,与受体的S1区域作用较弱,相对而畜与S4区域及中间部的作用较强,导致在相互作用的过程中被受体排斥出来.结论 通过配体与受体动态相互作用模拟研究表明,作为FXa的抑制剂与受体S1区结合的部分结构应该相对刚性,能与受体形成较强的氢键,在S4区需要一定的疏水性和芳香性,在中间部分需要一定量的氢键来帮助固定配体.
-
抗栓药Apixaban
由百时美施贵宝公司和辉瑞公司联合研制的抗栓药apixaban(曾用代号BMS-562247,BMS-562247-01)属于氨基苯并噁唑类化合物,是一种高选择性、可逆的凝血因子Xa抑制剂,口服有效,临床前研究和Ⅰ期研究结果显示该药具有较好的抗血栓作用,且安全性和耐受性良好.目前,将apixaban用于防治静脉血栓的Ⅱ期临床试验已完成,Ⅲ期临床研究正在进行中.
-
抗炎、抗凝双效融合蛋白TAP-SSL5表达载体的构建及其功能研究
目的 构建一种具有抗炎和抗凝双效功能的融合蛋白,并对共功能进行初步鉴定.方法 将重组金黄色葡萄球菌超抗原样蛋白-5(staphylococcal supemntigen-like protein-5,SSL5)与蜱抗凝血肽(tick anticoagulant peptide,TAP)融合,从金黄色葡萄球NCTC8325菌株中克隆SSL5基因;经DNA重组技术,将编码pelB前导序列、SSL5和TAP的基因重组并克隆于原核表达载体pHOG21中,再转染于大肠杆菌B121中扩增表达,制备融合蛋白SSL5-TAP或TAP-SSL5,采用流式细胞仪检测融合蛋白是否和SSL5一样,具有与粒细胞表面P-选择素糖蛋白配体-1(P-selectin glycoprotein ligand-1,PSGL-1)结合的特性;采用反应底物法在体外检测融合蛋白对活化的凝血因子X(factor Xa,FXa)活性的抑制作用.结果 TAP-SSL5保留了SSL5与PSGL-1结合的特性,并且融合蛋白TAP-SSL5可显著抑制FXa的活性(P<0.01),抑制率达39.5%.结论 融合蛋白TAP-SSL5是一种以PSGL-1为靶向的新型抗炎、抗凝双效分子.
-
新型口服抗凝血药
血栓栓塞性疾病是一种常见的心脑血管疾病,抗凝血药在预防和治疗这一疾病中发挥了重要作用.新型口服抗凝药与华法林相比更加有效预防血栓栓塞,颅内出血风险更低,还能降低死亡率,但高成本可能是其广泛使用的障碍.
