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我国分离的两株病毒为重组甲病毒
目的明确我国分离的XJ-90260和XJ-91006病毒的分类地位、种系发生和遗传型。方法 特异引物逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增两株病毒的NSP4、E1基因区和3′端非编码区,测序,进行核苷酸序列同源性比较和3′端非编码区核苷酸序列分析,并结合同属其他病毒这些基因区的核苷酸序列进行种系进化分析。结果 两株病毒的核苷酸序列同源性为100%,与西方马脑炎病毒的核种酸序列同源性高,具有西方马脑炎病毒3′端非编码区结构特征,其NSP4基因区与东方马脑炎病毒同源,E1基因区与辛德毕斯病毒同源,两株病毒均位于西方马脑炎病毒B组,与西方马脑炎病毒俄罗斯分离株进化关系近。结论 我国分离的XJ-90260和91006病毒属于西方马脑炎病毒同一遗传型,均为重组甲病毒。
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风疹病毒IgG抗体参考品的建立
目的:建立人风疹病毒IgG抗体参考盘,为风疹病毒IgG抗体检测试剂盒的性能评价提供可靠的质控物质.方法:通过风疹病毒IgG抗体检测试剂盒进行血清筛选和复核,免疫荧光方法和Western blot方法对筛选的血清进行确认,获得了符合要求的血清,组成了含有10份阳性血清和5份阴性血制成参考品的P1~P10和N1~N5、重复性参考品R以及检测限参考品L1,共有17支参考品的参考盘.经过不同方法学的性能验证,确立风疹病毒IgG抗体参考盘的性能指标,并且参考盘的稳定性进行测试.结果:经风疹病毒IgG抗体检测试剂盒初筛和复核、以及免疫荧光法和Westem blot方法确认,确定10份风疹病毒IgG阳性血清样本和5份阴性血清样本,选择其中一份阳性样本作为重复性参考品,10 IU· mL-1作为检测限参考品,构建成人风疹病毒IgG抗体参考盘.确定了参考盘的性能指标:1.准确性(阳性符合率):检测国家阳性参考品10份样本,要求假阴性应不得出现.2.特异性(阴性符合率):检测国家阴性参考品5份样本,要求假阳性应不得出现.3.重复性(精密度):批内精密度RSO不大于15.0%.4.检测限:用风疹病毒IgG抗体检测试剂对国家低检出限参考品进行检测,要求L1应能检出.稳定性研究结果表明,参考盘的稳定性良好.成功地建立了人风疹病毒IgG抗体国家参考盘.结论:该参考盘为临床实验室质量评价提供了可靠的参考物质,可用于国内大多数试剂盒的性能评价要求.