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可溶性HLA-G1上调活化的同种反应性T细胞表达FasL促进其凋亡
目的探讨可溶性HLA-G1对活化的同种反应性T细胞FasL表达及凋亡的影响. 方法借助基因工程技术构建表达可溶性HLA-G1的真核表达质粒;把重组质粒转染入宿主细胞,表达可溶性HLA-G1并借助免疫亲和层析技术纯化可溶性HLA-G1蛋白;用EB病毒转化的同种异体B淋巴细胞作为刺激细胞,通过长期混合淋巴细胞培养,激活同种反应性T细胞.活化T细胞经不同浓度可溶性HLA-G1处理12 h后,用Western blot法检测其FasL表达情况;处理24 h后,用FACS检测其凋亡情况. 结果可溶性HLA-G1能够上调活化的同种反应性T细胞表达FasL;能够促进活化的T细胞发生凋亡,且上述作用具有剂量依赖性. 结论可溶性HLA-G1分子能够使活化的同种反应性T细胞表达FasL升高,进而促进其凋亡.
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可溶性人类白细胞抗原-G1 cDNA的克隆及序列分析
目的 建立表达可溶性HLA-G1蛋白的真核表达载体pcDNA3-sHLA-G1。方法 从绒癌细胞系Jeg-3细胞中提取总RNA,借助RT-PCR技术扩增可溶性HLA-G1的cDNA并把其插入真核表达载体pcDNA3,然后经酶切和测序法鉴定。结果 经酶切鉴定及测序分析,证实已成功构建pcDNA3-sHLA-G1。结论 本研究成功构建可溶性HLA-G1的真核表达载体。