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P1蛋白片段文献资料
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肺炎支原体P1蛋白片段免疫学活性及黏附功能的研究
目的 了解肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1蛋白第1125 ～1395氨基酸片段(P1C蛋白)的免疫学活性及其细胞黏附作用.方法 构建用于表达重组P1C片段(rP1C)的原核表达载体pGEX6p-2/p1c,采用SDS-PAGE和Western blot鉴定rP1C.采用基于GST的亲和层析法提纯rP1C,提纯的rP1C免疫BALB/c小鼠,ELISA检测小鼠抗rP1C血清的效价.采用Western blot检测rP1C对Mp感染患者血清的免疫反应性.采用间接免疫荧光法检测rP1C黏附HeLa细胞及其免疫血清黏附抑制作用.结果 所构建的原核表达系统能有效表达相对分子质量约为66×103的可溶性rP1C.rP1C免疫小鼠后,其抗血清ELISA效价高达1∶64000.rP1C能被Mp感染者血清及小鼠抗rP1C血清识别并与之结合.rP1C能黏附HeLa细胞,其抗血清可阻断Mp对HeLa细胞的黏附,该黏附阻断作用随抗血清浓度增高而增强.结论 rP1C具有良好的免疫原性和免疫反应性及黏附细胞功能,可作为Mp疫苗及血清学检测的候选抗原.
