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同源重组构建表皮葡萄球菌附属基因调节子(agr)阴性突变株
目的构建表皮葡萄球菌agr阴性突变株,以期得到除agr基因以外相同遗传背景的突变株与野生株. 方法首先构建同源重组质粒pBT2-△agr,后电转入金黄色葡萄球菌RN4220,再转入表皮葡萄球菌3298.通过pBT2载体对温度敏感的特点,含重组质粒的表皮葡萄球菌3298在40℃多次传代,终筛选出agr阴性的突变株. 结果同源重组质粒pBT2-△agr通过酶切鉴定证明构建成功,表皮葡萄球菌3298接受来自金黄色葡萄球菌RN4220的重组质粒,经酶切鉴定正确.40℃多次传代后,经抗生素抗性筛选,并经斑点杂交及序列分析,证明获得表皮葡萄球菌3298-agr阴性突变株. 结论用同源重组的方法完成表皮葡萄球菌3298-agr阴性突变株的构建,使agr基因被大部分剔除掉.为今后研究表皮葡萄球菌agr基因在调节其生物膜形成的功能提供实验资料.
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金黄葡萄球菌附属基因调节子与生物被膜及耐药的研究进展
近年来由于金黄葡萄球菌(Staphylococcus au-reus)感染率的增加、产生耐药速度的加快,以及其易于从急性感染向慢性、持久性、复发性感染转变等特点,金黄葡萄球菌(简称金葡菌)导致的感染已逐渐成为人们关注的焦点.其附属基因调节子(ac-cessory gene regulator,Agr)是一种重要的密度感应(quorum sensing,QS)信号系统和毒力因子调节系统,参与金葡菌的生物被膜(biofilm)形成和毒力因子(virulence factor)表达[1].本文就国外近年来有关金葡菌Agr与生物被膜和耐药性方面的研究进行综述.
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同源重组构建表皮葡萄球菌附属基因调节子(agr)阴性突变株