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铜绿假单胞菌密度感应信号分子OdDHL对小鼠肥大细胞作用观察
目的 通过化学合成铜绿假单胞菌密度感应(quorum sensing,QS)信号分子OdDHL,并观察该分子对小鼠肥大细胞生物学作用.方法 通过化学方法 合成OdDHL分子,经质谱、磁共振和高效液相色谱确定其结构和纯度,并采用OdDHL分子感应菌株检测其生物活性.以不同浓度OdDHL分子作用于小鼠肥大细胞系P815,观察不同时间点细胞活力改变、凋亡现象以及胞内钙离子变化.结果 成功合成具有生物活性的OdDHL分子,该分子能以时间、剂量依赖方式抑制细胞活力,并能诱导细胞凋亡,同时可上调胞内钙离子浓度.结论 铜绿假单胞菌OdDHL分子可诱导P815细胞凋亡并上调胞内钙离子浓度.
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一种新的乙酰高丝氨酸内酯水解酶基因的克隆和表达
目的 获得新的降解革兰阴性细菌数量阈值感应信号分子乙酰高丝氨酸内酯类化合物(AHL)的水解酶基因.方法 选择性富集和培养土壤中耐热细菌,抽取细菌总DNA作为模板,特异性聚合酶链反应扩增乙酰高丝氨酸内酯水解酶基因,进行克隆和DNA序列分析及原核表达.结果 得到1个新的AHL水解酶基因,该基因与已知基因的核苷酸序列和对应的氨基酸序列同源性高分别为87%和94%.该基因在原核表达系统中表达,得到了与预期相对分子质量(Mr)一致的蛋白质.结论 证实乙酰高丝氨酸内酯水解酶广泛存在于环境微生物中,为进一步研究提供条件.
关键词: 乙酰高丝氨酸内酯水解酶 自体诱导分子 数量阈值感应