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HPV L1 C-末端保守氨基酸序列的免疫生物学性质的探讨
目的 探讨HPV L1 C-末端保守氨基酸序列的免疫生物学性质.方法 以合成HPVL1保守序列短肽、点突变该序列中酰胺化酶作用位点后的短肽以及15个氨基酸残基长的该序列交错合成的4个小肽免疫动物.采用T细胞增殖实验确定各肽是否含有T细胞表位;以ELISA方法确定各肽有无B细胞表位及有效免疫位点.结果 不同肽免疫鼠T细胞增殖实验差异无统计学意义(P＞0.05),两短肽免疫兔血清中IgG抗体滴度显著强于4个小肽,但兔和鼠分泌物中均未测出抗体IgG.两短肽的免疫血清对相应短肽的反应明显强于交叉反应的强度.原序列短肽的免疫血清对来自于该短肽的N-末端序列短肽的反应略强,而点突变酰胺化酶作用位点后短肽的免疫血清对C-末端序列的短肽反应略强.结论 HPV L1保守序列短肽和点突变酰胺化酶作用位点后短肽在诱导体液免疫的能力方面相似,但在交叉免疫反应性及有效免疫位点方面存在差异;两短肽的免疫原性显著强于4个小肽.
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人乳头状瘤病毒L1及人端粒酶RNA基因在高危型人乳头状瘤病毒阳性子宫颈脱落细胞中的表达
目的 探讨高危型人乳头状瘤病毒(HR-HPV)阳性子宫颈脱落细胞中人乳头状瘤病毒L1(HPVL1)及人端粒酶RNA(hTERC)基因的表达及其与子宫颈病变的相关性.方法 选择有子宫颈活组织检查结果的HR-HPV阳性子宫颈脱落细胞学标本300例,其中子宫颈活组织检查结果为正常及慢性炎症46例、子宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ 95例、CINⅡ58例、CINⅢ64例、子宫颈鳞状细胞癌(SCC)37例.采用免疫细胞化学MaxVision法检测液基细胞学标本中抑癌基因HPVL1的表达,用荧光原位杂交技术(FISH)检测子宫颈脱落细胞中hTERC基因的扩增水平.结果 HPVL1阳性率在正常及慢性炎症、CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ及SCC组中分别为58.70％(27/46)、63.16％(60/95)、37.93％(22/58)、10.94％(7/64)、0(0/37),随着子宫颈病变恶性程度的增高,HPVL1阳性率逐渐降低.hTERC扩增阳性率在正常及慢性炎症、CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ、SCC组中分别为6.52％(3/46)、11.58％(11/95)、51.72％(30/58)、85.94％(55/64)、100.00％(37/37),与子宫颈病变的严重程度呈正相关(rs=0.302,P＜ 0.01).HPVL+/hTERC-在CIN Ⅰ中占57.89％,在CINⅢ中占4.69％;HPVL1-/hTERC+在CIN Ⅰ中占6.32％,CINⅢ中占79.69％.结论 联合检测HPVL1及hTERC在HR-HPV阳性子宫颈病变的诊断中具有重要的作用.
