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DNA免疫制剂文献资料
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含恶性疟原虫Pf70基因片段表达载体DNA的免疫学特性
目的研究恶性疟原虫Pf70 DNA片段作为DNA疫苗候选抗原基因的可能性. 方法应用PCR方法从含有恶性疟原虫Pf70基因DNA片段的质粒pGEX-Pf70中扩增出包含Pf70 DNA片段的长度为957bp的PCR产物.将其插入带有乙肝表面抗原基因的真核表达载体pCMV-S中,构建出重组质粒pCMV-S-Pf70.用提纯的重组质粒pCMV-S-Pf70作为DNA免疫制剂,以质粒pCMV-S DNA和经过谷胱甘肽亲和层析法纯化的融合蛋白GST-Pf70作为对照,免疫昆明种小白鼠.每隔14d加强免疫1次,加强免疫2次后第7天采小鼠全血,用流式细胞仪检测CD8+ T淋巴细胞和CD4+ T淋巴细胞的水平,以检测体液免疫和细胞免疫状况. 结果接种了重组质粒pCMV-S-Pf70小鼠CD8+ T淋巴细胞的绝对量增加,其百分比含量增加了39%;CD4+ T淋巴细胞的相对含量保持恒定,绝对量稍有增加.用ELISA法分别检测经重组质粒pCMV-S-Pf70免疫的小鼠和经融合蛋白GST-Pf70免疫的小鼠血清中抗Pf70蛋白质的抗体滴度,发现前者抗体滴度约为1∶800,远远低于后者的滴度(1∶5 000).研究结果证明,重组质粒pCMV-S-Pf70 DNA可以诱导小鼠产生很强的细胞免疫和相对于蛋白质免疫而言较弱的体液免疫;Pf70蛋白质可以诱导小鼠产生很强的体液免疫. 结论恶性疟原虫红内期Pf70 DNA片段是有前景的红内期DNA疫苗候选抗原基因片段.
