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共表达ETEC CFA/Ⅰ、CS6福氏痢疾减毒株与单独表达CFA/Ⅰ及CS6混合疫苗株的免疫原性比较
目的以减毒志贺菌为载体,研制肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC)多价疫苗可以有效防治细菌性腹泻. 方法以共表达肠毒素大肠杆菌定居因子CFA/Ⅰ和CS6的重组减毒福氏痢疾疫苗株FWL01(pZCF16)和两种混合的表达CFA/Ⅰ的FWL01(pZHY21)和表达CS6的FWL01(pZLG6)减毒福氏痢疾疫苗株,分别以同等剂量口服免疫BALB/c小鼠,比较二者肠毒素大肠杆菌定居因子的免疫效果. 结果免疫BALB/c小鼠全部产生了抗CFA/Ⅰ和CS6的特异性血清抗体IgG和分泌型抗体sIgA,共表达CFA/Ⅰ、CS6的减毒福氏痢疾菌FWL01(pZCF16)的免疫原性与混合的FWL01(pZHY21) 和FWL01(pZLG6) 相似或稍高. 结论在同一菌株可以表达多种菌毛,构建ETEC多价疫苗有效可行.
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肠毒素大肠杆菌定居因子CS6抗原基因在大肠杆菌中的高效表达
目的:构建表达肠毒素大肠杆菌(ETEC)定居因子CS6的重组质粒,并在大肠杆菌DH5α中高效表达.方法:利用基因工程的方法,将含有CS6基因的质粒pMG233用限制性内切酶ClaⅠ酶切,得到长约3.1 kb的CS6片段(含有CS6结构基因及调控基因的DNA片段);并与用限制性内切酶ClaⅠ酶切的表达载体质粒pBV321连接,得到含有CS6片段的重组质粒pMG235,转化至大肠杆菌DH5α.结果:SDS-PAGE、Western印迹及免疫荧光观察的结果表明,重组菌DH5α/pMG235可高效表达相对分子质量为14 600的CS6抗原蛋白,并在重组菌表面表达,表达产物可被抗CS6多克隆抗体识别.结论:重组菌可稳定表达肠毒素大肠杆菌定居因子抗原CS6.
