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不同黏膜上皮细胞中巨噬细胞炎性蛋白-3α转录水平的荧光定量RT-PCR比较分析
目的 定量比较分析不同黏膜上皮细胞中人巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)的转录水平.方法 体外转录制备MIP-3α RNA标准品,人工合成MIP-3α mRNA序列特异的引物及TaqMan探针.利用TaqMan EZ RT-PCR试剂盒的反应体系和ABI实时荧光定量PCR仪进行实时荧光定量RT-PCR.通过对RT-PCR产物测序、使用标准品和质控品进行多次独立测试等评估实时荧光定量RT-PCR方法的特异性、灵敏度和可重复性.随后对不同黏膜上皮细胞系Caco-2、T-84、HeLa和淋巴细胞系PM1中MIP-3α mRNA水平进行了定量检测.结果 建立了可用于MIP-3α mRNA水平定量检测的实时荧光定量RT-PCR方法,该方法特异性好(扩增片段测序结果与参考序列完全一致)、灵敏度高(25 μl反应体系中有5个拷贝就可以检出)、检测样品浓度范围广(103～1010拷贝/ml).对Caco-2、T-84、HeLa和PM1细胞中MIP-3α mRNA水平的定量分析表明,肠黏膜上皮细胞Caco-2和T-84的MIP-3α mRNA水平比HeLa和PM1细胞高.结论 黏膜上皮细胞能表达丰富的MIP-3α,不同黏膜上皮细胞MIP-3α的表达水平可能不同.
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初诊肺癌患者血清IL-8、Fractalkine、MIP-3α表达与肺癌临床特征的相关性分析
目的 分析初诊肺癌患者血清白细胞介素-8(IL-8)、趋化因子(Fractalkine)、巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)表达与肺癌临床特征的相关性.方法 回顾性分析大连大学附属中山医院2013年1月～2015年12月收治的90例初诊肺癌患者(初诊肺癌组,其中小细胞癌21例、非小细胞癌69例)和同期门诊体检结果无异常的90名健康者(健康组)的临床资料.首先比较初诊肺癌组和健康组血清IL-8、Fractalkine、MIP-3α水平;其次将初诊肺癌组患者根据Ⅰ+Ⅱ期和Ⅲ+Ⅳ期、小细胞癌和非小细胞癌进行分组,比较血清IL-8、Fractalkine、MIP-3α水平;后采用Pearson相关检验分析初诊肺癌组患者血清IL-8、Fractalkine、MIP-3α 三个指标之间的相关性.结果 ①初诊肺癌组患者血清IL-8、Fractalkine、MIP-3α[水平均明显高于健康组(均P＜ 0.01).②Ⅰ+Ⅱ期组患者血清IL-8、Fractalkine、MIP-3α水平均明显低于Ⅲ+Ⅳ期组(均P＜0.01).③小细胞癌组患者血清IL-8、Fractalkine、MIP-3α水平均高于非小细胞癌组,但差异无统计学意义(P＞0.05).④Pearson相关分析显示,IL-8与Fractalkine(r=0.598,P＜ 0.05)、IL-8与MIP-3α(r=0.641,P＜0.05)、Fractalkine与MIP-3α(r=0.682,P＜0.05)之间均存在线性相关性.结论 初诊肺癌患者血清IL-8、Fractalkine、MIP-3α水平高于健康人员,且随着病情的加重而升高,但不同病理分型之间水平无显著差异,三个指标相互呈线性相关,可作为初诊肺癌患者病情判断的指标.
关键词： 肺癌 白细胞介素-8 Fractalkine 巨噬细胞炎性蛋白-3α -
辛伐他汀对脑缺血-再灌注损伤大鼠周围血MIP-3α、BDNF、cleaved Caspase-3表达与mNSS 的影响
目的通过观察辛伐他汀对脑缺血-再灌注损伤大鼠巨噬细胞炎性蛋白-3α（ MIP-3α）、脑源性神经营养因子（ BDNF）、活化的Caspase-3的表达及神经功能评分的影响，揭示辛伐他汀在促进脑缺血-再灌注损伤大鼠神经功能恢复中的作用。方法成年雄性Wistar大鼠60只，随机分为3组：缺血-再灌注损伤后辛伐他汀治疗组；缺血-再灌注损伤后生理盐水对照组；假手术组。每组各20只。采用Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血-再灌注模型，缺血2h 后给予再灌注。治疗组缺血-再灌注损伤1d 后口服辛伐他汀1mg· kg－1· d－1；对照组口服等量生理盐水；假手术组只分离血管。各组大鼠在治疗后1、3、5、7、14d进行神经功能评分（ mNSS评分），检测血清中MIP-3α和BDNF的表达以及各组大鼠脑组织中活化的Capsase-3的表达。结果 mNSS评分结果显示在给药的前3d，治疗组与对照组相比神经功能恢复没有明显差别（ P＞0．05）。给药后第5天至第14天，治疗组神经功能恢复明显好于对照组（ P＜0．05）。血清中MIP-3α的表达结果显示，治疗组与对照组在给药后第1天没有明显差异，而从治疗的第3天开始直至实验结束。结论治疗组MIP-3α的水平始终低于对照组（ P＜0．05）。治疗组血清中BDNF的表达，给药后的第5天开始直至结束显著高于对照组（P＜0．05）。治疗组在给药第3天和第5天后，脑组织中活化的Caspase-3表达低于对照组（P＜0．05），而到给药第14天时这种差异不明显。
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大鼠脑缺血再灌注损伤后血清MIP-3α与IL-6、TNF-α的关系
目的 研究巨噬细胞炎性蛋白-3alpha(MIP-3α)、IL-6和TNF-α存大鼠局灶性腑缺血再灌注损伤中给予中和抗体前后不同时间点的表达；探讨CC亚族趋化冈子MIP-3α与IL-6和TNF-o的关系.方法 Wistar大鼠66只随机分为3组:假手术对照组6只、缺血-再灌注损伤组30只；MIP-3α中和抗体组30只.缺血再灌注损伤组和MIP-3α中和抗体组均按缺血再灌注后不同时间点再分为5组,每组6只.采用线拴法制作大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO),于缺血90min后再灌注,中和抗体组于再灌注同时腹腔注射MIP-3α中和抗体5μg/100g大鼠,分别于不同时间点采取大鼠静脉血,ELISA法检测血清中MIP-3α、IL-6和TNF-α.结果 缺血再灌注损伤组MIP-3α、IL-6、TNF-α于再灌注后各时间点的表达明显高于对照组；MIP-3α中和抗体组的MIP-3α于各时间点表达较缺血再灌注组明显降低；IL-6、TNF-c于缺血再灌注后3h、6h依然升高,与缺血再灌注组相同时间点比较(P＞0.05),差别无统计学意义;而12h两者增高则显著减慢,以后至48h 一直下降.结论 IL-6和TNF-α可能是诱导了MIP-3α的产生；而MIP-3又趋化IL-6和TNF-α炎性因子的表达从而形成恶性循环加重脑缺血再灌注损伤.
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鼻咽癌患者血清MIP-3α与cystatin A表达及其临床意义
背景与目的：目前，检测鼻咽癌的病灶残留、复发、远处转移，评价放化疗敏感性及判断预后主要依赖影像学的检查。寻找鼻咽癌早期诊断及预后相关的特异性分子标志物对鼻咽癌的早期诊断及个体化治疗具有重要意义。本研究通过检测血清巨噬细胞炎性蛋白-3α(macrophage inflammatory protein-3α，MIP-3α)和cystatin A蛋白在鼻咽癌患者治疗前、后及健康人中的表达情况，探讨其在鼻咽癌诊断、与临床病理特征关系以及疗效评价中的作用。方法：应用定量酶联免疫吸附法检测140例初治无远处转移的鼻咽癌患者治疗前、治疗结束后血清中MIP-3α和cystatin A的表达情况，并以100名健康体检者为对照。结果：以血清MIP-3α水平为31 pg/mL及cystatin A水平为16 ng/mL诊断鼻咽癌的敏感度分别为92.1%及42.1%，特异度分别为86.0%及85.0%。140例鼻咽癌患者经过治疗后均达到完全缓解或者部分缓解。鼻咽癌患者治疗前血清MIP-3α和cystatin A水平显著高于治疗后和健康对照者。MIP-3α和cystatin A均与鼻咽癌临床分期相关，MIP-3α还与T分期有关。治疗后完全缓解患者的血清MIP-3α降至健康对照者水平。部分缓解患者仍高于健康对照者水平，而完全缓解与部分缓解患者的血清cystatin A均降至健康对照者水平。在1年内发生远处转移的患者治疗后血清MIP-3α和cystatin A水平均明显高于未发生远处转移患者和健康对照者。MIP-3α和cystatin A表达之间存在相关性。结论：血清MIP-3α水平作为辅助诊断鼻咽癌的指标有一定的临床意义。血清MIP-3α与cystatin A检测有助于判断鼻咽癌分期和治疗后的近期疗效。
关键词： 鼻咽癌 巨噬细胞炎性蛋白-3α Cystatin A 临床疗效 -
呼吸道前驱感染对IgA血管炎患儿血清IL-23、MIP-3α水平的影响及意义
目的 探讨呼吸道前驱感染对IgA血管炎(IgAV)患儿血清白细胞介素-23(IL-23)和巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)水平的影响及意义.方法 收集急性期IgAV患儿共47例,根据有无呼吸道前驱感染,将其分为无呼吸道感染的IgAV组(IgAV1组)、有呼吸道感染的IgAV组(IgAV2组),并收集同期呼吸道感染组23例、正常对照组20例,所有受试者共90例.第一步运用抗体芯片半定量检测各组中的部分受试者(总例数=16)血清细胞因子水平,采用倍数分析方法筛选出可能有意义的生物因子,再进一步用酶联免疫吸附试验(ELISA)定量检测各组中其余受试者(总例数=74)血清该细胞因子的水平.结果 ①运用抗体芯片半定量检测和分析,初步筛选出IL-23和MIP-3α可能为有意义的细胞因子.②运用ELISA定量检测血清IL-23、MIP-3α水平发现:IgAV患儿血清IL-23的水平〔(48.56±34.27)ng/L〕与正常对照组〔(5.85±3.69)ng/L〕相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.01).IgAV1组、IgAV2组、呼吸道感染组血清IL-23水平均明显高于正常对照组,IgAV2组血清IL-23水平高于其余各组,差异均有统计学意义(P<0.05).IgAV1组、IgAV2组的血清MIP-3α水平与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05).结论 MIP-3α与IgAV的发病无明显相关.异常升高的IL-23水平可能参与IgAV的免疫发病机制.呼吸道感染可能通过促使IgAV患儿血清IL-23水平升高,进而引起免疫紊乱,诱发IgAV.
关键词： IgA血管炎 过敏性紫癜 免疫 白细胞介素-23 巨噬细胞炎性蛋白-3α -
血清IL-8、 Fractalkine、MIP-3α(对于初诊肺癌患者病情的诊断价值
目的 探讨白细胞介素-8(IL-8)、Fractalkine和巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)对于初诊肺癌患者病情的诊断价值.方法 选择279例肺癌患者及同期进行体检的志愿者70例的资料进行回顾性分析.首先按照TNM分期将患者分为I期组72例、Ⅱ期组73例、Ⅲ期组75例、Ⅳ期组59例.同时将初诊肺癌患者按照病理类型分为小细胞癌组91例与非小细胞癌组188例.分析各组患者IL-8、Fractalkine、MIP-3α指标及其之间的关系.结果 按照TNM分期分组的情况下,五组患者的血清IL-8、Fractalkine和MIP-3α浓度比较,差异均有统计学意义(F分别=23749.66、10655.44、3959.77,P均＜0.05).两两比较显示,TNM不同分期组患者的IL-8、Fractalkine和MIP-3α浓度均明显高于对照组(q分别=8.53、7.40、6.55、5.66、11.26、12.36、10.29、8.88、7.65、5.70、6.67、9.92,P均＜0.05),且IL-8、Fractalkine和MIP-3α浓度与TNM分期呈正相关(r分别=0.98、0.98、0.97,P均＜0.05).按照病理类型分组的情况下,三组患者的血清IL-8、Fractalkine和MIP-3α浓度比较,差异均有统计学意义(F分别=345.27、478.91、447.58,P均＜0.05).两两比较显示,小细胞癌组和非小细胞癌组患者的IL-8、Fractalkine和MIP-3α浓度均明显高于对照组(q分别=7.72、6.46、8.92、9.55、11.25、9.57,P均＜0.05),但小细胞癌组和非小细胞癌组之间比较,差异无统计学意义(q分别=1.20、0.22、0.22,P均＞0.05).利用血清IL-8、Fractalkine和MIP-3α浓度指标对五组患者进行判别分析,交叉验证判别正确率为100％.结论 初诊的肺癌患者IL-8、Fractalkine和MIP-3α三种趋化因子的浓度水平高于健康人,并且与疾病严重程度相关,三种趋化因子的浓度与肺癌类型并没有关系,利用三种趋化因子水平对初诊肺癌患者进行病情推断拥有较高的诊断价值.
关键词： 白细胞介素-8 巨噬细胞炎性蛋白-3α 肺癌 TNM分期 -
寻常性银屑病患者血清MCP-1和MIP-3α的检测及意义
目的 探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和巨噬细胞炎性蛋白-3α(MIP-3α)与寻常性银屑病的关系.方法 采用双抗体酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清MCP-1和MIP-3α水平.结果 寻常性银屑病患者血清MCP-1和MIP-3α水平均明显高于正常人;进行期患者高于静止期(P＜0.05)、退行期(P＜0.05)及对照组(P＜0.05).结论 寻常性银屑病患者血清MCP-1和MIP-3α水平升高,可能与其发病机理有关.
关键词： 银屑病 单核细胞趋化蛋白-1 巨噬细胞炎性蛋白-3α
