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金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌血流感染小鼠模型的建立及评价
目的 建立临床常见的细菌性血流感染早期诊断小鼠模型,为血流感染早期标志物的寻找和验证提供稳定可靠的实验模型.方法 选择金黄色葡萄球菌ATCC25923和肺炎克雷伯菌ATCC700603为实验菌株,将不同浓度的细菌悬液通过尾静脉注入小鼠体内,按Karber法计算半数致死量(LD50),以1/2LD50浓度注射小鼠,通过其体征、体重变化,白细胞(WBC)、血小板(PLT)、白细胞介素-6(IL-6)等指标变化,及血培养、PCR和HE染色结果等综合评价模型,验证造模效果.结果 金黄色葡萄球菌的LD50约8.1×108 CFU/ml,肺炎克雷伯菌的LD50约1.11×109 CFU/ml.小鼠感染24 h后体重明显下降.正常小鼠WBC为(1.42±0.66)×109/L,注射菌液3 h后开始升高,6 h后明显升高后下降,48 h后WBC再次升高,168 h后仍无明显下降,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).PLT在感染后24 h内明显下降(P<0.05).IL-6含量在肺炎克雷伯菌感染后升高较早,且升高幅度较金黄色葡萄球菌明显.感染后48 h内小鼠全血培养结果均为阳性,PCR结果证实了血流感染病原菌为金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌.HE染色结果表明感染后肝和肺存在炎细胞浸润.结论 成功建立了金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌的小鼠血流感染模型,为血流感染的早期诊断和不同病原菌感染的鉴别诊断等研究提供了可靠的动物模型.
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经小鼠尾静脉注射诱导肺炎克雷伯菌血流感染模型的建立及评价
目的 建立可靠的肺炎克雷伯菌血流感染模型,为细菌性血流感染早期诊断相关研究提供可靠的依据.方法 选择肺炎克雷伯菌标准株ATCC 700603为实验菌株,将不同浓度的细菌悬液通过尾静脉注入小鼠体内,按Karber法计算LD50,以1/2LD50浓度注射小鼠,通过其体征变化、体重变化、血培养、分子生物学试验、H·E染色等指标综合评价模型,验证造模效果.结果 小鼠LD50为1.11×109 CFU/ml,菌液感染小鼠1 h后开始出现立毛,活动减少;感染前体重为(33.60±1.21)g,注射菌液后1天内体重下降至(28.86±1.42)g,跟对照组比较有明显差别(P<0.05),7天后恢复正常水平(33.17±1.72)g;正常小鼠白细胞为(1.42±0.66)×109/L,注射菌液3h后升至(2.52±1.01)×109/L,6 h升至(3.08±0.85)×109/L,跟对照组比较有明显差别(P<0.05),2天后白细胞进一步升至(6.88±3.11)×109/L,7天后仍无明显下降;小鼠全血培养结果表明前2天任意时间血培养结果为阳性;毒力因子引物扩增疑似菌DNA,结果表明小鼠血流感染病原菌均为肺炎克雷伯菌;注射菌液1天后小鼠肺泡明显渗出、水肿、白细胞浸润;2天后肺结构逐渐恢复,肝恢复速度较肺慢.结论 建立了小鼠肺炎克雷伯菌血流感染模型,能够为血流感染的早期诊断和不同病原菌感染的鉴别诊断等研究提供了可靠的动物模型.
